叶绿素铜钠盐联合吉西他滨通过诱导铜死亡治疗胰腺癌：开启协同抗癌新征程

《Molecular Medicine》：Chlorophyllin exerts synergistic anti-tumor effect with gemcitabine in pancreatic cancer by inducing cuproptosis

胰腺癌（PC）死亡率高，对吉西他滨（GEM）化疗反应有限。研究人员开展了叶绿素铜钠盐（CHL）联合 GEM 治疗 PC 的研究。结果显示二者有协同抗肿瘤作用，能抑制癌细胞增殖等并诱导凋亡。该研究为 PC 治疗提供新途径。

　　胰腺癌，这一隐匿而致命的 “癌症杀手”，正日益威胁着人类的健康。它的 5 年生存率仅约 13%，在美国是第三大癌症死因，预计到 2040 年将跃居第二。早期难以察觉、易发生远处转移的特性，使得多数患者确诊时已错过手术时机，化疗成为主要治疗手段。吉西他滨作为胰腺癌化疗的基石药物，却常遭遇原发性和继发性耐药问题，联合化疗虽能提升疗效，但毒性也随之增加，患者往往难以承受。因此，探寻新的治疗策略迫在眉睫。

西安交通大学第一附属医院的研究人员挺身而出，勇挑攻克胰腺癌治疗难题的重担。他们开展了一项意义重大的研究，聚焦于叶绿素铜钠盐联合吉西他滨治疗胰腺癌的效果及机制探究。研究发现，叶绿素铜钠盐与吉西他滨联合使用，能显著发挥协同抗肿瘤作用，有效抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移，诱导细胞凋亡，在体内实验中也成功抑制了肿瘤生长，且安全性良好。这一成果为胰腺癌患者带来了新的希望，为胰腺癌的治疗开辟了一条新的道路。该研究成果发表在《Molecular Medicine》杂志上。

研究人员在此次研究中运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，采用细胞活力检测（CCK-8 assay）评估细胞增殖能力，通过集落形成实验观察细胞克隆形成情况；运用划痕实验和 Transwell 实验检测细胞的迁移和侵袭能力；借助流式细胞术（Flow cytometry）分析细胞凋亡水平；利用相关试剂盒测定细胞内活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）、铜离子（Cu²⁺）等物质的含量。此外，还通过蛋白质免疫印迹（Western blotting assay）检测蛋白表达水平，利用定量实时聚合酶链式反应（qRT–PCR）分析基因表达情况。在动物实验中，构建了裸鼠肿瘤异种移植模型，以评估药物组合在体内的抗肿瘤效果和安全性。

研究结果具体如下：

• CHL 和 GEM 协同抑制 PC 细胞增殖：通过 CCK-8 实验发现，CHL 对胰腺癌细胞增殖有抑制作用，且对正常胰腺导管上皮细胞影响较小。CHL 与 GEM 联合使用时，相比单药治疗，对 MIA PaCa-2 和 BxPC-3 细胞增殖的抑制作用显著增强，具有浓度依赖性。利用 SynergyFinder 软件和 Chou-Talalay 方法分析，均证实二者存在协同效应。
• CHL 和 GEM 协同抑制 PC 细胞的致癌生长、迁移和侵袭，并诱导细胞凋亡：集落形成实验表明，联合用药对 PC 细胞集落形成的抑制作用比单药更明显。流式细胞术分析显示，联合治疗使肿瘤细胞凋亡显著增加。伤口愈合实验和 Transwell 实验结果表明，联合用药能更有效地抑制 PC 细胞的迁移和侵袭能力。
• CHL 改变 PC 细胞的氧化还原状态并增加细胞内 Cu²⁺水平：实验数据显示，CHL 处理后，PC 细胞内 GSH 水平显著降低，ROS 水平升高，细胞内 Cu²⁺浓度明显增加，而 GEM 处理对 Cu²⁺水平无显著影响，表明 CHL 可改变 PC 细胞的氧化还原环境并引发铜毒性。
• CHL 与 FDX1 结合，促进 PC 细胞中 DLAT 寡聚化和氧化应激：Western blotting 分析发现，CHL 处理后，PC 细胞中 FDX1 蛋白水平下降，HSP70 蛋白水平上升，DLAT 蛋白虽无明显表达量变化，但寡聚化程度增加。免疫荧光实验进一步证实了 DLAT 蛋白的聚集。AutoDock 工具预测显示，CHL 可与 FDX1 形成氢键，表明 CHL 可能通过结合 FDX1 诱导铜介导的细胞毒性。
• CHL 诱导 PC 细胞发生铜死亡：通过添加铜死亡激活剂 Elesclomol（ELE）和抑制剂 Ammonium tetrathiomolybdate（TTM）进行实验，结果表明 CHL 抑制 PC 细胞生长和诱导凋亡的作用可被 ELE 增强，被 TTM 部分抵消，且相关蛋白水平和细胞内 ROS 水平也发生相应变化，证明 CHL 诱导 PC 细胞发生铜死亡。
• CHL 和 GEM 在体内协同抑制 PC 肿瘤生长且具有潜在安全性：在裸鼠 MIA PaCa-2 异种移植模型实验中，联合治疗组的肿瘤生长抑制效果优于单药治疗组。H&E 和 TUNEL 染色结果显示联合治疗组肿瘤细胞凋亡明显。对主要器官的 H&E 染色和血清肝肾功能分析表明，联合治疗对实验动物的器官无明显损伤，安全性良好。

研究结论表明，CHL 与 GEM 联合治疗对 PC 细胞的增殖、侵袭和迁移具有协同抑制作用，在体内也能有效抑制肿瘤生长，且安全性良好。CHL 可通过多种途径诱导铜死亡，联合 GEM 化疗能增强治疗胰腺癌的效果。

在讨论部分，研究人员指出，胰腺癌的高发病率和死亡率严重威胁公众健康，化疗在其治疗中至关重要，但吉西他滨的耐药性和联合化疗的毒性问题亟待解决。本研究中 CHL 与 GEM 联合治疗展现出的协同抗肿瘤效果，为胰腺癌的辅助治疗提供了新策略。同时，研究还揭示了 CHL 诱导铜死亡的潜在机制，为理解其抗癌作用提供了理论依据。不过，研究也存在一些局限性，如 CHL 降低 GSH 的信号通路、CHL 与 FDX1 相互作用的机制等尚未完全明确。未来需要进一步深入研究，以完善对这一联合治疗方案的认识，推动其在临床中的应用，为更多胰腺癌患者带来生存的希望。