鼻内给药联合细胞穿透肽提升 PSD - 95 抑制剂 NA - 1 脑递送效率的创新突破

《Drug Delivery and Translational Research》：The PSD-95 inhibitor NA-1 is delivered to the brain upon nasal administration with uptake into the olfactory bulb improved by co-administration with the cell-penetrating peptides lowPro and Tat

为解决缺血性脑卒中治疗中 PSD - 95 抑制剂 NA - 1 静脉给药的局限，研究人员开展了鼻内给药提升 NA - 1 脑摄取及降低脱靶效应的研究。结果发现，鼻内给药可使 NA - 1 递送至脑，与 Tat、LowPro 共给药可提高嗅球摄取，且减少脱靶分布，意义重大。

　　缺血性脑卒中，就像一场突如其来的风暴，每年无情地袭击着数百万人。目前，针对缺血性脑卒中的治疗手段十分有限，主要是通过血栓切除术或溶栓来实现再灌注，然而却没有有效的药物能够抑制与缺血性脑卒中相关的兴奋性毒性。这种兴奋性毒性会严重损害患者的认知功能，极大地降低他们的生活质量。

PSD - 95 抑制剂 NA - 1（也称为 nerinetide）在缺血性脑卒中的治疗方面展现出了一定的潜力，临床前研究以及 3 期临床试验都取得了不错的成果。但是，传统的静脉给药方式却存在诸多问题。一方面，NA - 1 在全身循环中会广泛分布到各个器官，导致其在脑部的暴露量减少；另一方面，它还会与溶栓药物阿替普酶（alteplase）相互作用，使得原本的神经保护作用消失。

为了突破这些困境，来自哥本哈根大学药学院、比伯拉赫应用科学大学应用生物技术研究所等机构的研究人员展开了深入研究。他们另辟蹊径，探索鼻内给药这一全新的途径，希望能够提高 NA - 1 的脑摄取量，同时减少全身的脱靶效应。

研究人员首先建立了猪原代嗅觉细胞培养模型。从 2 - 4 个月大的猪的鼻部获取嗅黏膜，经过一系列复杂的处理后，将细胞接种在 Transwell? 插入物上，让其在气液界面（ALI）条件下成熟和极化。通过多种实验技术，如蛋白质免疫印迹（Dot blotting）、免疫细胞化学（Immunocytochemistry）、细胞代谢活性检测（Cellular metabolic activity）、跨上皮电阻测量（Transepithelial electrical resistance，TEER）以及电感耦合等离子体质谱（Inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP - MS）等，对模型进行了全面的评估。

研究结果显示，该模型具有良好的黏液分泌和上皮屏障特性，适合进行药物渗透研究。在对模型化合物的研究中发现，体外模型对化合物的渗透具有大小选择性，而在体内却未观察到这种选择性。例如，荧光素钠（sodium fluorescein）和 4 KDa 异硫氰酸荧光素葡聚糖（4 KDa fluorescein isothiocyanate，FITC - dextran）在体外渗透模型时，表现出了明显的大小差异，荧光素钠的渗透量远高于 FITC - dextran；然而在小鼠体内，FITC - dextran 在肝脏、脾脏和肺部的积累却比荧光素钠更明显。

对于 NA - 1 的研究发现，它能够渗透体外嗅黏膜模型。与 PenShuf 共给药虽然可以提高 NA - 1 的渗透能力，但同时也对屏障产生了一些不利影响。而在体内实验中，鼻内给药能够使 NA - 1 递送至脑部，尤其是嗅球。与细胞穿透肽 Tat 和 LowPro 共给药可以显著提高 NA - 1 在嗅球中的摄取量，不过对脑部其他区域的摄取量并没有明显提升。此外，与静脉给药相比，鼻内给药的 NA - 1 在脱靶组织中的分布明显减少。

综合来看，这项研究意义重大。它证明了鼻内给药是 NA - 1 一种可行的给药途径，有望克服静脉给药的局限性，并且在急性缺血性脑卒中的治疗中，能够实现与阿替普酶同时使用，为缺血性脑卒中的治疗提供了新的思路和方法。

在研究方法方面，研究人员主要运用了以下关键技术：一是原代细胞培养技术，建立猪原代嗅觉上皮细胞模型；二是多种检测技术，如通过 Dot blotting 检测黏液分泌，利用 Immunocytochemistry 检测细胞相关蛋白表达，运用 Cellular metabolic activity 评估细胞活力，采用 TEER 测量上皮屏障完整性；三是运用 ICP - MS 定量分析 NA - 1 在组织中的含量。

研究结论和讨论部分进一步强调，鼻内给药使 NA - 1 成功递送至小鼠脑部，且脱靶组织分布显著减少。与 Tat 或 LowPro 共给药虽能改善 NA - 1 在嗅球的递送，但对脑部其他区域效果不佳。这为后续研究提供了方向，如探索调整 NA - 1 与细胞穿透肽的摩尔比是否能改善其在脑部其他区域的递送。同时，鼻内给药在缺血性脑卒中治疗中的应用潜力巨大，有望为临床治疗带来新的突破，为患者带来更多希望。