利用 CRISPR/Cas 介导的 DYSF 基因转录激活构建肌营养不良蛋白病体外模型及其重大意义

《Cell and Tissue Biology》：Development of an In Vitro Model of Dysferlinopathy via CRISPR/Cas-Mediated Transcriptional Activation of the DYSF Gene

为开发单基因疾病的基因治疗和基因组编辑方法，研究人员利用 CRISPR/Cas9-SAM 转录激活系统，在 HEK293T 细胞和肌营养不良蛋白病患者成纤维细胞中激活 DYSF 基因，检测到其 mRNA 和蛋白，该成果可用于评估肌营养不良蛋白病基因治疗的体外疗效。

　　摘要：科学家需要人类组织的细胞模型，以开发针对单基因疾病的基因治疗和基因组编辑方法。最好使用微创方法获取样本，这些组织可用于进一步筛选，以选择恢复靶蛋白合成的最有效方法。方法：研究人员使用 CRISPR/Cas9-SAM 转录激活系统，该系统可确保 DYSF 基因在 HEK293T 细胞以及患有肌营养不良蛋白病（c.2779delG (Ala927LeufsX21)）患者的成纤维细胞中表达。结果与讨论：在对 DYSF 基因进行靶向激活后，能够检测到主要的基因产物：mRNA 和蛋白（HEK293T_TA）以及 mRNA（成纤维细胞）。结论：转录激活的肌营养不良蛋白缺陷型成纤维细胞和 HEK293 细胞可用于评估肌营养不良蛋白病基因治疗的体外疗效。