自我调节基因疗法改善雷特综合征小鼠模型表型并克服基因剂量敏感性，为临床试验奠定基础

雷特综合征（RTT）由 MECP2 基因突变引发，传统基因疗法存在问题。来自相关团队的研究人员开展了 EXACT 技术研究，该技术能精准调控 MECP2 表达。研究发现 NGN-401 可改善小鼠表型、耐受性良好，为 RTT 的 1/2 期临床试验（NCT05898620）提供支撑。

　　雷特综合征（Rett syndrome，RTT）是一种由 X 染色体上 MECP2（methyl-CpG binding protein 2）基因功能缺失变异引起的神经发育障碍疾病。传统的基因转移方法会导致细胞内转基因表达不一致。这种变异性可能会带来问题，尤其是在雷特综合征这种情况下，因为 MECP2 基因的过表达也会产生不良影响。为了解决这些挑战，研究人员设计了一种名为通过构建调整实现表达衰减（Expression Attenuation via Construct Tuning，EXACT）的基因调控系统。该系统利用基于微小核糖核酸（microRNA）的前馈回路，不仅能确保转基因表达更一致，还能防止过度表达。通过基于细胞的筛选试验，研究人员证明了 EXACT 回路调节全长人类 MeCP2 表达的能力。与传统构建体相比，EXACT-MECP2 构建体的细胞蛋白丰度范围更窄。此外，在体外以及野生型小鼠和雷特综合征模型小鼠中，EXACT 回路的调控程度会随着转基因剂量的增加而增强。基于细胞和体内测试，研究人员确定了用于自我调节 MECP2 基因治疗的腺相关病毒 9 型（adeno-associated virus serotype 9，AAV9）构建体的最佳配置，命名为 NGN-401。通过脑室内注射将 NGN-401 递送至新生雄性 Mecp2^?/y半合子小鼠体内，与接受载体处理的动物相比，这些小鼠的生存期延长，雷特综合征样表型得到改善。与传统构建体产生毒性不同，NGN-401 在雌性 Mecp2^+/?小鼠和健康幼年非人灵长类动物中耐受性良好。这些研究结果为 NGN-401 在雷特综合征中的首次人体儿科试验（ClinicalTrials.gov，NCT05898620）奠定了基础。