PLA2G7：膀胱癌免疫逃逸新靶点，开辟免疫治疗新路径

《Cell Death & Disease》：PLA2G7 promotes immune evasion of bladder cancer through the JAK-STAT-PDL1 axis

为解决膀胱癌免疫治疗响应率低的问题，研究人员开展了关于 PLA2G7 在膀胱癌免疫逃逸中作用的研究。结果发现 PLA2G7 通过 JAK-STAT-PD-L1 轴促进膀胱癌免疫逃逸，靶向该轴或成新治疗策略，为膀胱癌治疗提供新思路。

　　膀胱癌是泌尿系统常见癌症，全球每年新增病例超 57 万，死亡超 20 万。当前治疗手段包括手术、放化疗和免疫治疗，但预后仍不理想。免疫治疗中，针对程序性死亡受体 1（PD-1）/ 程序性死亡配体 1（PD-L1）的疗法虽有成效，却因肿瘤异质性等问题，仅部分患者受益。因此，探寻膀胱癌免疫逃逸机制、寻找新治疗靶点迫在眉睫。

浙江大学医学院附属第一医院的研究人员针对这一问题展开研究，发现磷脂酶 A2 第 7 组（PLA₂G7）在膀胱癌免疫逃逸中起着关键作用，相关成果发表于《Cell Death and Disease》。

研究人员运用多种技术方法开展研究。从浙江大学医学院附属第一医院获取膀胱癌及癌旁正常组织样本。细胞实验方面，培养 5637、T24 和 MBT-2 等膀胱癌细胞系，通过细胞转染构建 PLA₂G7 敲低和过表达细胞模型；利用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测相关蛋白和基因表达；借助 Transwell 实验、伤口愈合实验评估细胞迁移和侵袭能力。动物实验上，构建小鼠异种移植模型，观察肿瘤生长情况；运用流式细胞术分析肿瘤内免疫细胞浸润和活性。还通过生物信息学分析挖掘潜在调控机制。

研究结果如下：

1. PLA₂G7 在膀胱癌中高表达且影响预后：通过分析癌症基因组图谱（TCGA）数据库数据、RT-qPCR、Western blot 和免疫组化检测，发现 PLA₂G7 在膀胱癌组织中表达显著高于正常组织，且高表达与肿瘤分期相关，意味着更差的预后。
2. PLA₂G7 对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭影响不显著：构建稳定敲低 PLA₂G7 的 5637 和 T24 细胞系，经 MTS 实验、克隆形成实验、伤口愈合实验和 Transwell 实验证实，敲低 PLA₂G7 对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力无显著影响。
3. PLA₂G7 促进膀胱癌免疫逃逸：流式细胞术分析、蛋白和 RNA 检测表明，敲低 PLA₂G7 显著抑制 PD-L1 表达，增强 T 细胞杀伤活性；体内实验显示，敲低 PLA₂G7 在免疫健全小鼠中抑制肿瘤生长，促进 CD8⁺T 细胞浸润。
4. PLA₂G7 通过 JAK-STAT 通路调控 PD-L1 表达：对敲低 PLA₂G7 的细胞进行 RNA 测序和 KEGG 通路分析，发现其影响细胞黏附、细胞因子受体相互作用等免疫相关通路；进一步研究表明，PLA₂G7 通过上调 STAT1 和 STAT3 磷酸化，激活 JAK-STAT 通路，促进 PD-L1 表达。
5. PLA₂G7 抑制剂的作用：PLA₂G7 抑制剂 darapladib 处理膀胱癌细胞，MTS 实验显示不影响细胞增殖，但能降低 PD-L1、p-STAT1 和 p-STAT3 表达，在免疫健全小鼠中抑制肿瘤生长。
6. PLA₂G7 过表达的影响：构建 PLA₂G7 过表达膀胱癌细胞系，发现过表达促进 PD-L1 表达，降低 T 细胞杀伤活性，且敲低 STAT1 和 STAT3 可抑制该促进作用。
7. 联合治疗效果显著：构建小鼠模型，发现敲低 PLA₂G7 联合抗细胞毒性 T 淋巴细胞相关蛋白 4（CTLA4）治疗，比单独 CTLA4 阻断更有效抑制肿瘤生长，促进 CD8⁺T 细胞浸润，提高小鼠生存率。
8. ETS1 调控 PLA₂G7 表达：通过生物信息学分析和实验验证，发现转录因子 ETS1 促进 PLA₂G7 表达，进而影响 PD-L1 表达和免疫逃逸。

研究结论表明，ETS1 介导的 PLA₂G7 过表达，通过调控 STAT1 和 STAT3 磷酸化，导致 PD-L1 过表达，促进膀胱癌免疫逃逸。该研究为膀胱癌免疫治疗提供新靶点和策略，靶向 ETS1-PLA₂G7-STAT1/STAT3-PD-L1 轴有望改善膀胱癌患者预后，也为后续深入研究膀胱癌免疫逃逸机制和开发新型治疗方法奠定基础，推动膀胱癌治疗领域的发展。