DEPTOR：抑制淋巴瘤发生的关键因子及潜在治疗新靶点

为探究 DEPTOR 对淋巴瘤发生的调控作用，浙江大学医学院等机构的研究人员构建 Deptor 突变小鼠模型开展研究。结果发现，DEPTOR 通过促进 EGFR 降解抑制淋巴瘤发生，其在人淋巴瘤组织中表达下调。该研究为淋巴瘤治疗提供了新策略。

　　在人体的免疫系统中，淋巴瘤就像一群捣乱的 “坏分子”，它起源于淋巴细胞，种类繁多，严重威胁着人们的健康。目前，虽然针对淋巴瘤的治疗研究不断推进，但仍有许多关键问题亟待解决。其中，PI3K/AKT/mTOR 通路在淋巴瘤中异常激活，成为治疗的重要靶点，然而 DEPTOR 作为 mTOR 的天然抑制剂，在淋巴瘤发生过程中的具体作用却尚不明确。为了深入了解这一谜题，浙江大学医学院等多机构的研究人员展开了相关研究，该研究成果发表在《Cell Death & Differentiation》杂志上。
研究人员主要运用了基因工程技术（构建 Deptor 基因敲入（KI）和敲除（KO）小鼠模型）、蛋白质分析技术（免疫组化（IHC）、免疫印迹（IB）、免疫沉淀）以及质谱分析技术等。
研究结果如下：

1. DEPTOR^S275A抑制体内淋巴瘤发生：研究人员构建了表达 DEPTOR^S275A的 KI 小鼠模型，该突变体对 SCF^β-TrCP介导的降解具有抗性。将其与 Pten^+/-小鼠杂交后发现，与 Deptor^+/+;Pten^+/-小鼠相比，Deptor^S275A/S275A;Pten^+/-小鼠的淋巴结大小和重量减小，细胞排列更有序，Ki67 染色减少，这表明 DEPTOR^S275A显著抑制了 Pten 杂合缺失引发的淋巴瘤发生。同时，IHC 和 IB 分析显示，DEPTOR^S275A通过使 mTORC1/2 信号失活来发挥抑制作用。
2. DEPTOR^S275A降低 EGFR 水平并使 RAS/MAPK 信号失活：通过对淋巴瘤组织进行无标记定量质谱分析，研究人员发现 DEPTOR^S275A突变体抑制淋巴瘤发生可能涉及其他机制，其中 MAPK 信号通路显著下调。进一步研究证实，DEPTOR^S275A降低了 EGFR 水平，通过 IHC 和 IB 分析发现，在 Deptor^S275A/S275A;Pten^+/-淋巴瘤中，EGFR 和磷酸化 ERK1/2 的染色及水平均降低。
3. DEPTOR^S275A促进 EGFR 通过蛋白酶体降解：研究表明，DEPTOR 与 EGFR 结合，且 DEPTOR KI 不影响 EGFR 的 mRNA 水平。在 Deptor^S275A/S275A;Pten^+/-淋巴瘤相关的原代细胞中，蛋白酶体抑制剂 MG132 可阻断 EGFR 蛋白水平的降低，且 EGFR 蛋白半衰期明显缩短，这说明 DEPTOR^S275A可能通过蛋白酶体促进 EGFR 降解。
4. DEPTOR 促进 HUWE1 与 EGFR 的相互作用：利用亲和纯化结合质谱技术，研究人员发现 DEPTOR 与 E3 泛素连接酶 HUWE1 结合。在 HEK293 细胞和淋巴瘤细胞中，DEPTOR、HUWE1 和 EGFR 形成复合物。DEPTOR 通过其 PDZ 结构域与 HUWE1 的 N 端区域结合，促进了 HUWE1 与 EGFR 的相互作用。在 Deptor^S275A/S275A;Pten^+/-小鼠的淋巴瘤中，EGFR 与 HUWE1 的结合增强。
5. 人淋巴瘤组织中 DEPTOR 蛋白水平降低：通过对人类蛋白质图谱数据的分析以及对人淋巴瘤组织微阵列的 IHC 染色，研究人员发现 DEPTOR 在人淋巴瘤组织中的表达水平显著低于正常淋巴结组织，这表明 DEPTOR 表达的降低可能与人类淋巴瘤的发生相关。
6. DEPTOR 缺失促进体内淋巴瘤发生：利用 Deptor KO 小鼠模型，研究人员发现与 Deptor^+/+;Pten^+/-小鼠相比，Deptor^-/-;Pten^+/-小鼠的淋巴瘤大小和重量增加，细胞恶性程度更高，Ki67 阳性染色细胞增多。此外，Deptor 缺失还缩短了 Pten^fl/fl;MMTV-Cre 小鼠的寿命，促进了胸腺淋巴瘤的形成。
7. DEPTOR 缺失诱导 EGFR 水平升高并激活 MAPK 和 mTORC1/2 通路：对 Deptor^+/+;Pten^+/-和 Deptor^-/-;Pten^+/-小鼠淋巴瘤的 IHC 和 IB 分析显示，Deptor 缺失导致 EGFR、p-ERK1/2、p-4E-BP1 和 p-AKT 的染色和水平升高，表明 DEPTOR 缺失激活了 MAPK-ERK 和 mTORC1/2 信号通路，从而促进淋巴瘤发生。
   研究结论和讨论部分指出，本研究明确了 DEPTOR 在淋巴瘤发生中作为肿瘤抑制因子的关键作用。在正常生理条件下，DEPTOR 增强 EGFR 与 HUWE1 的结合，促进 EGFR 通过蛋白酶体降解，使 ERK1/2 失活，同时抑制 mTORC1 和 mTORC2，进而抑制淋巴瘤发生。而在 PTEN 部分失活等致癌情况下，DEPTOR 水平降低，稳定 EGFR，解除对 mTORC1/2 的抑制，激活相关信号通路，促进淋巴瘤发生。这一研究揭示了 DEPTOR 在淋巴瘤发生中的重要调控机制，为开发新的淋巴瘤治疗策略提供了理论依据。未来，通过开发能够恢复 DEPTOR 水平的小分子药物，抑制 EGFR-ERK1/2 和 mTOR 信号通路，有望为淋巴瘤患者带来新的希望。