单核细胞衍生树突状细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎早期发病中的关键作用研究

《BMC Ophthalmology》：Do the monocyte-derived dendritic cells exert a pivotal role in the early onset of experimental autoimmune uveitis?

为探究自身免疫性葡萄膜炎（AU）发病机制，南开大学等机构研究人员以实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）小鼠为模型展开研究。结果发现，moDCs 在 EAU 早期大量浸润，且泼尼松醋酸酯（PA）眼药对其分化和浸润无明显抑制作用，这为 AU 治疗提供了新方向。

　　在眼睛的奇妙世界里，它本是免疫特权部位，可自身免疫性葡萄膜炎（AU）却打破了这份平静。AU 会引发炎症，导致白内障、青光眼甚至失明，可其发病机制一直是个谜。眼组织独特的免疫微环境，让探寻关键免疫细胞和细胞因子变得尤为重要。在这样的背景下，南开大学、天津眼科医院等机构的研究人员，踏上了探索之旅，他们的研究成果发表在《BMC Ophthalmology》上，为解开 AU 的谜团带来了新曙光。

研究人员主要运用了以下关键技术方法：一是构建 EAU 小鼠模型，选用 6 - 8 周龄雌性 C57BL/6J 小鼠，通过皮下注射葡萄膜致炎肽诱导发病；二是利用流式细胞术，对不同时间点小鼠视网膜细胞进行检测，分析各类细胞的浸润情况；三是采用免疫荧光染色，观察细胞在视网膜中的分布；四是运用定量实时聚合酶链反应（qRT - PCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot），检测相关细胞因子的表达。

下面来看具体的研究结果：

1. MoDCs 在 EAU 小鼠视网膜中更早且大量浸润：研究人员通过流式细胞术分析发现，在 EAU 疾病进展过程中，从 7 天到 13 天，单核细胞衍生树突状细胞（moDCs）的浸润和分化显著增加。在 10、13 和 16 天，moDCs 的数量明显高于传统树突状细胞（cDCs）。而且，使用泼尼松醋酸酯（PA）眼药处理后，moDCs 和 cDCs 的浸润未受影响，这表明 PA 无法抑制 moDCs 从单核细胞的分化和浸润12。
2. MoDCs 主要分布在 EAU 视网膜血管的浅层丛：通过免疫荧光染色检测 moDCs 表面标记 CD115 和 CD209，研究人员发现 moDCs 主要分布在视网膜血管的浅层丛，在中间层和深层丛信号较弱。其浸润趋势与流式细胞术结果一致，在对照组 13 天达到高峰，治疗组 10 天达到高峰，之后均下降34。
3. EAU 早期 moDCs 分化相关细胞因子的表达：研究人员利用 Western blot 和 qRT - PCR 检测相关细胞因子和转录因子的表达。结果显示，PA 对粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子（GM - CSF）的蛋白表达无影响，但对其 mRNA 表达有抑制作用。转化生长因子 β1（TGF - β1）的蛋白和 mRNA 表达在 PA 处理下均升高。抗炎细胞因子 IL - 10 和 IL - 4 在早期下降，16 天显著上升。PA 对 moDCs 的转录因子 Irf4 和 Zbtb46 的表达也有不同影响56。

综合研究结果和讨论部分，研究人员得出结论：在 EAU 早期，moDCs 在数量和分化率上显著增加，是病理视网膜中主要的浸润树突状细胞群体，在抗原呈递和支持眼部自身免疫反应中起关键作用，而 cDCs 作用相对较小。传统的糖皮质激素眼药 PA 对抑制眼部 GM - CSF 和 TGF - β1 的表达、抑制 moDCs 的分化和浸润效果不佳。这一研究揭示了 moDCs 在 EAU 发病机制中的重要作用，为开发针对炎症相关疾病的新疗法提供了理论依据，特别是针对 moDCs 的靶向治疗可能成为改善 AU 治疗效果的新方向，对推动眼科学领域的发展具有重要意义。