Dl-3-n - 丁基苯酞：开启缺血性脑卒中神经再生新希望

《Molecular Neurobiology》：Dl-3-n-Butylphthalide Promotes Neurogenesis in Ischemic Stroke Mice Through Wnt/β-Catenin Signaling Activation and Neurotrophic Factor Production

缺血性脑卒中（Ischemic Stroke）是全球成年人致死和致残的主要原因之一，多数患者因错过治疗窗口存在神经功能缺损。研究人员开展了 Dl-3-n - 丁基苯酞（NBP）对缺血性脑卒中神经发生影响的研究，发现 NBP 可促进神经发生和功能恢复，为缺血性脑卒中治疗提供新方向。

　　在当今社会，脑卒中如同一个 “健康杀手”，严重威胁着人们的生命和生活质量。缺血性脑卒中作为脑卒中的主要类型，在全球范围内，是导致成年人死亡和长期残疾的重要原因之一。随着人口老龄化加剧，其发病率还在不断上升。目前，静脉溶栓和血管内取栓虽为急性缺血性脑卒中的有效治疗方法，但多数患者因治疗时间窗限制或医疗条件不足，无法及时接受再灌注治疗，最终遗留神经功能障碍。这就像在黑暗中寻找曙光，医学领域急需探索新的神经修复策略。

在此背景下，河北医科大学第二医院等机构的研究人员开展了一项关于 Dl-3-n - 丁基苯酞（NBP）对缺血性脑卒中影响的研究。该研究成果发表在《Molecular Neurobiology》杂志上，为缺血性脑卒中的治疗带来了新的希望。

研究人员采用了多种关键技术方法：选用成年雄性 C57BL/6 小鼠构建远端大脑中动脉闭塞（dMCAO）的缺血性脑卒中模型；通过给予不同剂量 NBP 进行药物干预；运用 Rota-rod 测试、改良神经功能缺损评分（mNSS）评估神经功能；利用 TTC 染色、HE 染色分别测量梗死体积和脑萎缩；采用激光散斑对比成像（LSCI）监测脑血流；运用免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR 等技术检测相关指标。

研究结果如下：

1. NBP 促进功能恢复并减少梗死面积：通过 Rota-rod 测试和 mNSS 评估，发现 20mg/kg 的 NBP 能显著改善 dMCAO 小鼠的神经功能恢复，且 NBP 可使梗死体积从 11.41%±1.11%（MCAO 组）降至 7.52%±1.06%（NBP 组），同时不影响小鼠体重变化和脑萎缩。
2. NBP 改善脑灌注和促进血管生成：利用 LSCI 技术监测脑血流，发现 NBP 治疗后，在第 14 天，右侧大脑中动脉区域的脑血流显著高于 MCAO 组。免疫染色结果显示，NBP 处理的小鼠微血管密度（13.7±0.86%）明显高于 MCAO 处理的小鼠（10.5±0.65%），且 NBP 处理后 BrdU⁺/CD31⁺细胞数量显著增加，表明 NBP 促进了缺血后的血管生成。
3. NBP 促进神经干细胞增殖和神经母细胞迁移：通过检测 BrdU 在脑组织中的掺入情况，发现 NBP 处理后，同侧脑室下区（SVZ）的 BrdU⁺和 BrdU⁺/Nestin⁺细胞数量显著增加，表明 NBP 促进了神经干细胞（NSCs）的增殖。以微管相关蛋白 DCX 标记神经母细胞，发现 NBP 使更多 DCX⁺细胞从 SVZ 向缺血皮层迁移，且 BrdU⁺/DCX⁺细胞数量显著增加，说明 NBP 促进了神经母细胞的迁移。
4. NBP 调节新生神经元分化：在梗死周边区域检测 BrdU 在神经元（NeuN 细胞）和星形胶质细胞（GFAP⁺细胞）中的掺入情况，发现 NBP 处理后，BrdU⁺/NeuN⁺细胞出现，而 BrdU⁺/GFAP⁺细胞数量未显著增加，表明 NBP 优先促进神经发生而非星形胶质细胞生成。
5. NBP 通过调节 Wnt/β-catenin 通路促进神经发生：Western blot 和 qRT-PCR 检测发现，NBP 上调了 Wnt-3a、p-GSK-3β 等蛋白水平，以及 TCF-4、cyclin D1 等 mRNA 水平，表明 NBP 激活了 Wnt/β-catenin 通路。使用 Wnt 抑制剂 DKK1 后，NBP 诱导的神经发生和功能恢复受到抑制，进一步证实 NBP 通过激活该通路加速神经发生。
6. NBP 促进神经血管调节蛋白的表达：检测发现 NBP 显著增加了血管内皮生长因子（VEGF）和脑源性神经营养因子（BDNF）在蛋白和 mRNA 水平的表达，且 VEGF 和 BDNF 部分来源于脑血管，提示它们在 NBP 诱导的神经发生中起关键作用。

研究结论和讨论部分指出，NBP 延迟治疗可引发一系列有益的生理反应，包括增强血管生成、促进神经增殖、引导内源性神经母细胞迁移到损伤区域并分化为成熟神经元，从而加速缺血性脑卒中的功能恢复。其保护作用可能是通过激活 Wnt/β-catenin 通路和促进神经生长因子表达来实现的。这为缺血性脑卒中的后期治疗提供了一种新的潜在药物，具有重要的临床意义。然而，研究也存在一定局限性，如 NBP 发挥作用的途径可能不止一条，Wnt/β-catenin 通路激活与神经生长因子表达之间的关系尚不明确，还需要进一步的研究来验证。但总体而言，这项研究为缺血性脑卒中的治疗开辟了新的道路，有望为众多患者带来更好的康复希望。