Tob 通过调控 NF-κB 信号通路：为乳腺癌治疗带来新曙光

《Cancer Gene Therapy》：Tob negatively regulates NF-κB activation in breast cancer through its association with the TNF receptor complex

在乳腺癌治疗中，因侵袭性乳腺癌治疗靶点少，NF-κB 信号通路机制不明。研究人员开展 Tob 对乳腺癌中 NF-κB 信号通路调控的研究，发现 Tob 负向调节 NF-κB 信号，这为乳腺癌治疗提供潜在新靶点和方向。

　　在癌症的复杂世界里，乳腺癌就像一座难以攻克的堡垒，尤其是侵袭性乳腺癌，治疗分子靶点少，让医生们常常感到棘手。而核因子 -κB（NF-κB）作为细胞内的 “信号指挥官”，它的异常激活与多种疾病紧密相连，在乳腺癌的发生、发展过程中更是扮演着关键角色。NF-κB 的过度活跃，不仅助力癌细胞疯狂增殖、顽强存活，还让它们对内分泌治疗产生抵抗，这无疑给乳腺癌的治疗雪上加霜。因此，深入探索 NF-κB 信号通路在乳腺癌中的分子机制，就成为了开启新型有效疗法大门的关键钥匙，这也正是此次研究的重要使命。

来自冲绳科学技术大学院大学（Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University）等机构的研究人员勇挑重担，投身到这项意义重大的研究中。他们将目光聚焦在 Tob 蛋白身上，这个属于 Tob/BTG 家族的 “抗癌小卫士”，之前就被发现与肿瘤抑制有着千丝万缕的联系。研究人员通过一系列实验，得出了令人振奋的结论：Tob 在乳腺癌中是 NF-κB 信号的负调节因子，它的表达水平与 NF-κB 活性以及乳腺癌的恶性程度呈负相关。这一发现就像在黑暗中点亮了一盏明灯，为乳腺癌的治疗提供了全新的潜在靶点和方向，有望为无数乳腺癌患者带来新的希望。该研究成果发表在《Cancer Gene Therapy》杂志上。

研究人员在此次研究中，运用了多种关键技术方法。他们借助免疫沉淀技术，深入探究蛋白之间的相互作用；利用实时定量 PCR（qRT-PCR），精准检测基因的表达水平；借助基因集富集分析（GSEA），全面挖掘基因集与疾病的关联；还通过细胞系研究，模拟乳腺癌细胞的行为。同时，研究中使用了来自癌症基因组图谱（TCGA）数据库的临床样本以及多种乳腺癌细胞系，为研究提供了丰富的数据支持。

下面来看具体的研究结果。

1. Tob 表达与 NF-κB 活性呈负相关：研究人员重新审视了 35 种乳腺癌细胞系的微阵列数据，并对不同亚型乳腺癌细胞系的 Tob 蛋白和 mRNA 表达水平进行测量。结果发现，NF-κB 活性高的癌细胞中，Tob 表达较低，二者呈明显的负相关关系。在对 534 名乳腺癌患者的 TCGA 数据库分析中，也得到了类似结论，恶性程度高的基底样和 claudin-low 亚型乳腺癌中，Tob 表达显著降低。
2. Tob 敲低增强 TNF-α 诱导的 IKK 激活和 NF-κB 驱动的转录：在 MCF-7 细胞中进行 Tob 敲低实验，结果显示，在 TNF-α 处理条件下，Tob 敲低细胞的 IKK-α/β（pIKK-α/β）磷酸化增强，IκB-α（pIκB-α）在 TNF-α 刺激后 2 - 5 分钟就开始快速磷酸化，同时 p38、c-Jun N 末端激酶（JNK）和 Erk 的磷酸化也增加，表明其活性增强。此外，NF-κB 调节基因的 mRNA 水平也显著提高。而 Tob 过表达则会延迟 IκB-α 和 IKKα/β 的磷酸化。
3. Tob 与 RIPK1 相互作用抑制多聚泛素化：研究发现 Tob 能与 RIPK1 和 NEMO 相互作用。在 Tob 敲除的小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）中，RIPK1 多聚泛素化更为显著。通过实验表明，Tob 与 RIPK1 的 Lys - 377 多聚泛素链相互作用，K377R 突变会大幅减少 Tob 与 RIPK1 的结合，这说明 Tob 通过与 RIPK1 多聚泛素支架结合，抑制了 NF-κB 信号转导。

在研究结论和讨论部分，研究人员指出，NF-κB 在细胞中至关重要，直接抑制它可能会带来副作用，而调节其上下游通路是更具潜力的癌症治疗策略。Tob 的缺失会促进肿瘤发展，一方面是因为它原本对细胞周期蛋白 D1（cyclin D1）的负调节作用丧失，另一方面，NF-κB 激活引发的慢性炎症也会助力肿瘤生长。同时，RIPK1 多聚泛素化的调节有望成为癌症治疗的新靶点，Tob 可能通过增强 CYLD 去泛素化酶活性来抑制 RIPK1 多聚泛素化。虽然此次研究取得了重要进展，但仍存在一些局限性。未来可以使用乳腺上皮细胞进行实验，利用小鼠肿瘤模型进一步探究 Tob 与 TNFR 复合物 I 的相互作用与乳腺癌恶性程度的关系，明确 Tob 与 RIPK1 相互作用的关键区域，以及研究 Tob 自身的多聚泛素化机制等。这些后续研究将进一步完善对 Tob 与乳腺癌关系的理解，为乳腺癌的治疗提供更坚实的理论基础和更有效的治疗方案，推动乳腺癌治疗领域向前迈进一大步。