PU.1/Spi1 调控机制新发现：为急性肾损伤治疗开辟新路径

为探究 PU.1/Spi1 在急性肾损伤（AKI）中对肾成纤维细胞激活的调控作用，研究人员建立小鼠 AKI 模型。结果显示，PU.1/Spi1 在 I/R 诱导的 AKI 中上调，通过上调 Gata2 促进成纤维细胞激活。抑制成纤维细胞激活或对 AKI 有益。

　　此前关于急性肾损伤（Acute Kidney Injury，AKI）的研究主要集中在肾小管细胞上，而成纤维细胞的具体作用在很大程度上被忽视了。近期有证据表明，转录因子 PU.1/Spi1 是成纤维细胞激活的重要调节因子，对 PU.1/Spi1 进行药理学或基因沉默，会破坏纤维化网络，将激活的成纤维细胞重编程为静止状态。在这项研究中，科研人员探究了 PU.1/Spi1 在 AKI 过程中是否以及如何调控肾成纤维细胞的激活。研究人员通过夹住雄性小鼠双侧肾动脉 30 分钟，建立了 AKI 小鼠模型。手术后 48 小时，处死小鼠并采集血液和肾脏样本。研究发现，在缺血 / 再灌注（Ischemia/Reperfusion，I/R）诱导的 AKI 中，PU.1/Spi1 的表达水平显著上调，且 PU.1/Spi1 特异性定位于成纤维细胞。同时，在 AKI 早期，观察到大量成纤维细胞被激活。敲除 PU.1/Spi1 基因后，成纤维细胞的激活明显减弱，炎症因子释放减少，肾小管损伤也减轻了。生物信息学分析表明，进化上保守的基因 GATA 结合蛋白 2（GATA binding protein 2，Gata2）可能是 PU.1/Spi1 的下游靶基因。在经历缺氧 / 复氧（Hypoxia/Reoxygenation，H/R）处理的原代培养小鼠肾成纤维细胞中，PU.1/Spi1、Gata2 和 α - 平滑肌肌动蛋白（α -SMA）的表达水平显著上调。激活的成纤维细胞增殖能力增强，表现为增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）以及细胞周期蛋白 B1（cyclin B1）和细胞周期蛋白 D3（cyclin D3）等细胞周期蛋白的上调。激活的成纤维细胞中炎症因子的分泌也增加了。经 H/R 处理的成纤维细胞的条件培养基，会诱导肾小管细胞损伤并增加细胞凋亡。通过染色质免疫沉淀和启动子 - 荧光素酶报告基因实验，证实了 PU.1/Spi1 能够结合到 Gata2 的启动子区域，并增强其转录。研究结果表明，间质成纤维细胞在 I/R 诱导的 AKI 早期被激活，并参与了肾损伤过程。上调的 PU.1/Spi1 通过上调其下游基因 Gata2，刺激成纤维细胞激活。抑制成纤维细胞的激活，可能对 AKI 的治疗有积极作用。