揭秘肺腺癌恶性进展 “帮凶”：TEAD4-DYNLL1 轴的关键作用

《European Journal of Medical Research》：The TEAD4-DYNLL1 axis accelerates cell cycle progression and augments malignant properties of lung adenocarcinoma cells

为解决肺腺癌（LUAD）患者生存率低的问题，研究人员开展了关于 DYNLL1 在 LUAD 进展中作用的研究。结果发现 TEAD4-DYNLL1 轴通过 Wnt/β-catenin 通路加速细胞周期进程、增强恶性特性。该研究为 LUAD 治疗提供了新靶点。

　　肺癌，这个全球范围内的 “健康杀手”，在众多恶性肿瘤中 “名列前茅”，而肺腺癌（LUAD）又是肺癌里的 “主力军”，约占肺癌诊断的 40% 。尽管治疗手段不断更新，从传统的手术、放疗、化疗，到如今的靶向治疗，但 LUAD 患者的整体生存率依旧不容乐观。许多患者确诊时已处于晚期，失去了最佳治疗时机，甚至部分早期患者也会面临癌症复发的难题。因此，寻找新的治疗靶点迫在眉睫。

来自苏州大学附属第一医院和复旦大学附属华山医院的研究人员，聚焦于 DYNLL1（dynein light chain LC8-type 1，动力蛋白轻链 LC8 型 1）在 LUAD 中的作用，开展了一系列研究。最终发现了 TEAD4（TEA 结构域转录因子 4）-DYNLL1 轴，它能通过 Wnt/β-catenin 通路加速细胞周期进程，增强 LUAD 细胞的恶性特性，这一发现为 LUAD 的治疗提供了全新的潜在靶点，具有重要的临床意义 。该研究成果发表在《European Journal of Medical Research》上。

研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，通过细胞转染技术，构建稳定转染的细胞系，实现对相关基因的敲低或过表达；采用 RNA 提取和定量 PCR 技术，检测基因表达水平；利用蛋白质免疫印迹（WB）分析，测定蛋白表达量。在动物实验中，建立小鼠移植瘤模型，用于观察肿瘤的生长情况；运用免疫组化（IHC）技术，分析肿瘤组织中相关蛋白的表达。

研究结果如下：

1. DYNLL1 在 LUAD 中异常上调：研究人员从 GEPIA 和 UALCAN 数据库获取相关基因数据，经分析发现 DYNLL1 在 LUAD 细胞中表达显著升高，且高表达的 DYNLL1 与患者预后不良相关。通过对正常肺上皮细胞（BEAS-2B）和 LUAD 细胞系（A549、NCI-H1395、NCI-H441）的检测，进一步验证了这一结果。
2. 沉默 DYNLL1 抑制 LUAD 细胞恶性表型并阻滞细胞周期：将 KD-DYNLL1 质粒转染到 NCI-H1395 和 NCI-H441 细胞中，结果显示细胞增殖活性、集落形成能力下降，细胞凋亡增加，迁移和侵袭能力受到抑制，细胞周期阻滞在 G₀/G₁期。同时，Cyclin D1 表达减少，p21 表达上调，β-catenin 水平降低。
3. KY19382 恢复 DYNLL1 敲低抑制的 LUAD 细胞周期进程：使用 Wnt/β-catenin 激动剂 KY19382 处理转染 KD-DYNLL1 的细胞，发现细胞增殖活性恢复，凋亡减少，细胞周期阻滞缓解，Cyclin D1 表达增加，p21 表达降低，细胞衰老被抑制。这表明 Wnt/β-catenin 通路参与了 DYNLL1 介导的细胞事件。
4. TEAD4 介导 LUAD 中 DYNLL1 的转录激活：通过生物信息学分析，筛选出与 DYNLL1 表达相关的潜在转录因子，发现 TEAD4 与之密切相关。ChIP-seq 和 ChIP-qPCR 分析证实 TEAD4 能结合到 DYNLL1 启动子区域，促进其转录。敲低 TEAD4 后，DYNLL1 表达显著下降。
5. DYNLL1 过表达激活 Wnt/β-catenin 通路并挽救 TEAD4 敲低抑制的 LUAD 细胞恶性特性：在转染 KD-TEAD4 的细胞中过表达 DYNLL1，结果显示细胞增殖活性恢复，凋亡减少，细胞周期阻滞和细胞衰老缓解，β-catenin 水平升高。这表明 DYNLL1 在 TEAD4 下游发挥作用，激活 Wnt/β-catenin 通路。
6. TEAD4 和 DYNLL1 影响小鼠 LA795 细胞的肿瘤发生：将稳定转染 KD-TEAD4 和 OE-DYNLL1 的小鼠 LUAD 细胞（LA795）接种到 BALB/c 小鼠体内，构建移植瘤模型。结果发现，敲低 TEAD4 抑制肿瘤生长，而过表达 DYNLL1 则加速肿瘤生长，逆转了敲低 TEAD4 的作用。同时，在肿瘤组织中也观察到与细胞实验一致的蛋白表达变化。

研究结论和讨论部分指出，该研究揭示了 TEAD4-DYNLL1 轴在 LUAD 细胞恶性进展中的重要作用，为 LUAD 的治疗提供了新的潜在靶点。然而，研究也存在一些不足，如可能还有其他调节 DYNLL1 转录的因素未被发现，功能获得性实验不够完善，缺乏临床样本数据等。尽管如此，这一研究成果仍为后续深入研究 LUAD 的发病机制和治疗策略奠定了基础，有望在未来为 LUAD 患者带来新的希望，推动肺腺癌治疗领域的发展 。