印度东北部地区蒿甲醚 - 本芴醇治疗疟疾的疗效及耐药分子标记物研究：现状与挑战

为评估蒿甲醚 - 本芴醇（AL）治疗印度东北部地区恶性疟原虫（P. falciparum）的疗效及循环寄生虫分子标记物状态，研究人员依 WHO 指南开展研究。结果显示 AL 总体有效，但相关基因存在突变，这对疟疾防控意义重大。

　　疟疾，这一由疟原虫（Plasmodium）引发的蚊媒寄生虫病，长期以来威胁着全球人类的健康。2023 年，全球约有 2.63 亿疟疾病例，其中 94% 来自非洲地区，1.5% 来自东南亚地区。印度在东南亚地区的疟疾负担中占比高达 50% ，该国东北部（NE）地区与奥里萨邦、恰蒂斯加尔邦和贾坎德邦等地，是恶性疟原虫疟疾的高发区域。

此前，由于氯喹（CQ）和磺胺多辛 - 乙胺嘧啶（SP）耐药性在印度东北部地区相继出现，2013 年起，蒿甲醚 - 本芴醇（AL）作为新的青蒿素联合疗法（ACT）被引入，用于治疗非复杂性恶性疟原虫感染病例。然而，印度东北部地区特殊的地理位置，使其成为耐药疟原虫传播的重要走廊。并且该地区地形复杂、交通不便，给疟疾的干预研究和监测工作带来了极大挑战。为了及时掌控 AL 的治疗效果，监测疟原虫耐药性的发展趋势，来自印度医学研究理事会部落健康国家研究所（ICMR - National Institute of Research in Tribal Health）和印度医学研究理事会疟疾国家研究所（ICMR - National Institute of Malaria Research）的研究人员开展了此项研究，相关成果发表在《Malaria Journal》上。

研究人员采用了多种关键技术方法：一是样本采集与筛选，在 2019 年 4 月至 12 月，从印度东北部的米佐拉姆邦（Mizoram）隆格莱区、阿萨姆邦（Assam）科克拉杰尔区、梅加拉亚邦（Meghalaya）南加罗山地区、西孟加拉邦（West Bengal）马尔达区和曼尼普尔邦（Manipur）丘尔钱德布尔区，筛选 1 - 60 岁的发热患者，确定符合条件的非复杂性恶性疟原虫感染患者并采集血样；二是药物治疗与监测，按照体重给予患者 AL 片剂口服，持续 3 天，并在 28 天的随访期内监测临床和寄生虫学参数；三是基因分析技术，提取基因组 DNA，通过巢式 PCR 扩增和测序分析 pfmdr¹、pfdhfr、pfdhps 和 pfk¹³基因的突变情况。

研究结果如下：

• 研究参与者与临床反应：共筛查 14931 名患者，疟疾阳性率为 2.9%，其中恶性疟原虫单一感染占 87.4%。231 例符合条件的患者入组，215 例完成 28 天随访。总体临床和寄生虫学有效反应（ACPR）达 98.6% ，仅 3 例（1.4%）出现晚期寄生虫学失败（LPF），且均在米佐拉姆邦研究点。多数患者（78.6%）寄生虫血症在≥24 小时内清除，米佐拉姆邦和梅加拉亚邦的寄生虫清除时间长于阿萨姆邦和西孟加拉邦。
• LPF 样本的分子分析：对 3 例 LPF 样本分析发现，1 例为复发（recrudescence），2 例为再感染（reinfection）。
• 抗疟药耐药相关基因的分子分析：pfmdr¹基因分析显示，15.8% 的样本为突变型，存在 Y184F、N86Y 等突变；pfdhfr 基因中，100% 的样本存在突变，常见突变类型有双突变和三突变等；pfdhps 基因中，90.5% 的样本为突变型，常见突变包括 S436F/A、G437A 等；pfk¹³基因分析发现，米佐拉姆邦有 2 个双突变和 1 个三突变，阿萨姆邦有 1 个双突变，梅加拉亚邦有 1 个双突变 。

研究结论与讨论：从临床结果看，AL 作为印度东北部地区治疗非复杂性恶性疟原虫疟疾的一线药物，治愈率达 99%，显示出良好疗效。但 pfmdr¹、pfdhfr、pfdhps 和 pfk¹³基因中与抗疟耐药相关的分子标记物突变率较高，尽管目前未影响药物临床疗效，但这是耐药性出现的早期迹象。印度要实现 2030 年消除疟疾的目标，必须重视抗疟药耐药问题，持续监测这些分子标记物，深入研究疟原虫从药物敏感到耐药的分子机制，以便及时调整治疗方案和防控策略，为疟疾防控提供有力支持。