泪腺腺样囊性癌肿瘤免疫微环境探秘：病理亚型、预后关联与免疫治疗新方向

《BMC Cancer》：Tumor immune microenvironment in adenoid cystic carcinoma of the lacrimal gland: relationship with histopathology and prognosis

为探究泪腺腺样囊性癌（LGACC）病理亚型、肿瘤免疫微环境（TIME）及与生存的关系，研究人员回顾性分析 18 例患者。发现 LGACC 由多种病理亚型构成，各亚型占比不同且与预后相关，TIME 模式因亚型而异，为免疫治疗提供新策略。

　　泪腺腺样囊性癌（LGACC）是一种源于泪腺的恶性肿瘤，在泪腺上皮性恶性肿瘤中较为常见，但它在头颈部所有腺样囊性癌中仅占约 25%。尽管当前针对 LGACC 有多种治疗手段，像手术切除联合辅助放疗，质子治疗和动脉内化疗也被证实能提升治疗效果，但这种肿瘤侵袭性强、易转移，一旦发生转移，有效治疗手段就非常有限，患者预后较差。

在肿瘤研究领域，肿瘤免疫微环境（TIME）对肿瘤预后的影响备受关注。免疫系统本可通过癌症免疫周期清除肿瘤细胞，但肿瘤会逐渐将 TIME 重塑为免疫抑制状态，帮助自身存活。不同免疫细胞在肿瘤发生发展中扮演着不同角色，比如髓源性抑制细胞（MDSC）和肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤生长，而细胞毒性淋巴细胞则营造抗肿瘤环境，预示较好的预后 。不过，此前针对 LGACC 的 TIME 深入研究较少，尤其是基于单细胞信息的研究匮乏，且多数关于腺样囊性癌免疫微环境的研究集中在唾液腺腺样囊性癌上。

为了填补这些研究空白，复旦大学附属眼耳鼻喉科医院的研究人员开展了一项回顾性研究。他们收集了 2012 年至 2021 年 18 例 LGACC 患者的石蜡切片，这些患者均签署了临床数据用于研究的知情同意书。研究经医院伦理委员会批准，遵循《赫尔辛基宣言》。研究人员旨在定量研究 LGACC 的病理亚型、各亚型中的肿瘤免疫微环境以及与患者生存的关系。该研究成果发表在《BMC Cancer》上。

研究人员运用了多种关键技术方法。首先，通过苏木精 - 伊红（H&E）染色确定肿瘤病理亚型，由两位经验丰富的病理学家分别评估。其次，采用多重免疫组化技术，选择白细胞共同抗原 CD45 等多种生物标志物来描述免疫细胞浸润情况。然后，利用 NanoZommer S60 扫描染色切片，借助 CellProfiler 软件和 ImageJ 图像处理流程进行图像分析，使用 FCS Express 7 Image Cytometry 软件对免疫染色阳性像素强度进行测量和定量分析。最后，运用描述性统计分析病理亚型百分比，通过 Kaplan - Meier 生存分析和 log - rank 检验计算总生存期，借助 SPSS statistics（version 19）软件辅助统计分析。

研究结果如下：

1. LGACC 的组织病理学模式构成：研究观察到 LGACC 存在 5 种传统病理模式，即筛状、管状、基底样、硬化型和粉刺癌型，部分区域还存在筛状和管状混合（C + T）模式。其中筛状是最常见的亚型，占比 39%；管状占 19%；基底样占 17%；C + T 模式占 14%；硬化型和粉刺癌型较少见，共占 11%。多数肿瘤由两到三种亚型混合组成。进一步分析发现，T2 期患者中，筛状为主型的预后优于非筛状为主型患者；基底样为主型的预后比非基底样为主型患者差；管状和 C + T 为主型患者与非主导型患者在生存时间上无显著差异。
2. LGACC 中 CD45 的表达：通过观察 CD45 表达评估免疫细胞浸润，根据 CD45 阳性细胞密度将肿瘤区域分为 “CD45 聚集”“CD45 稀疏” 和 “CD45 非浸润” 组。由于硬化型和粉刺癌型的细胞核计数稀少，难以观察 CD45 表达，故未纳入进一步分析。研究发现多数肿瘤区域 CD45 表达较低，筛状亚型的 CD45⁺浸润总体最高，肿瘤边缘（TM）区域的 CD45 表达水平次之，基底样亚型的 CD45 表达最低。
3. LGACC 的肿瘤免疫微环境：采用多重免疫组化进行空间免疫生物标志物分析描述 TIME。结果显示，LGACC 的 TIME 在不同病理表型间存在差异，免疫细胞浸润总体较低，且免疫细胞分布与病理表型相关，而非个体差异。CD8⁺和 CD4⁺细胞是 LGACC 中最丰富的免疫细胞，主要分布在 TM 和筛状区域，PD - 1 在 CD4⁺和 CD8⁺T 细胞上的表达较低，自然杀伤（NK）细胞在各病理亚型和 TM 区域中很少见，调节性 T 细胞（Treg）和巨噬细胞部分分布在筛状和 TM 区域，且 M2 巨噬细胞占比高于 M1 巨噬细胞。此外，基底样亚型中 NK 细胞最丰富，筛状亚型的肿瘤区域比其他亚型有更多免疫细胞浸润。

研究结论和讨论部分指出，LGACC 具有高度异质性，多数肿瘤由多种病理亚型组成且占比不同，不同病理亚型的淋巴细胞浸润存在差异。该研究首次全面定量分析了 LGACC 各病理亚型的占比，发现筛状 / 基底样为主型与预后相关，不同病理亚型的 TIME 差异揭示了潜在机制。不过，该研究样本量较小，未来需纳入更多患者，运用空间转录组学等更先进技术深入研究。同时，基于免疫细胞浸润差异开展临床试验，有望为 LGACC 的免疫治疗开辟新途径，为改善患者预后带来新希望。