磁载牙髓干细胞胞内囊泡银耳多糖微针治疗雄激素性脱发的研究

《Stem Cell Research & Therapy》：Tremella polysaccharide microneedles loaded with magnetic dental pulp stem cell intracellular vesicles used for androgenic alopecia

为解决间充质干细胞外泌体（EVs）在毛发再生领域因产量低受限的问题，研究人员开展了 “银耳多糖微针负载磁性牙髓干细胞胞内囊泡用于雄激素性脱发治疗” 的研究。结果表明，该微针能改善毛囊微环境，促进头发生长，为雄激素性脱发（AGA）治疗提供了新途径。

　　雄激素性脱发（AGA）是一种常见的皮肤疾病，虽然不危及生命，但却对患者的心理和社交活动产生显著影响。据统计，AGA 在男性中的发病率高达 85%，女性中也有 40%，且在年轻人中更为普遍。其发病机制主要是高雄激素产生大量双氢睾酮（DHT），作用于毛囊使其萎缩，同时导致微血管内皮细胞死亡。在脱发早期，真皮乳头细胞的血管退化破坏毛囊生态平衡，萎缩的毛囊还会刺激免疫细胞释放大量炎症因子，进一步恶化毛囊微环境。

此前，间充质干细胞外泌体（EVs）作为一种有潜力的非细胞疗法，在毛发再生领域受到广泛研究。它能够调节靶细胞的生物学活性，克服干细胞移植的一些局限性，然而其较低的产量限制了在临床的进一步应用。与此同时，牙髓干细胞（DPSC）来源的胞内囊泡（IVs）被发现产量比 EVs 更高，且含有多种营养因子，具有更好的应用前景。此外，传统的直接注射 EVs 方式存在分布不均和疼痛等问题，而微针阵列作为一种无痛、微创且可控的透皮给药系统，受到了研究人员的关注。在此背景下，武汉大学人民医院等机构的研究人员开展了相关研究，旨在开发一种新型的治疗 AGA 的方法。研究成果发表在《Stem Cell Research & Therapy》上。

研究人员运用了多种关键技术方法：首先通过特定的方法分离和鉴定 DPSC，并获取 EVs、IVs 和磁性胞内囊泡（Mag-IVs）；采用划痕实验、血管生成实验、蛋白质免疫印迹法（Western Blot）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）等多种实验技术，评估不同囊泡对细胞的影响；构建 AGA 小鼠模型，进行体内实验验证微针治疗效果，实验过程中对小鼠进行分组对照，观察各项指标变化。

研究结果如下：

• Mag-IVs 的获取、鉴定及摄取：通过免疫荧光等实验证明氧化铁纳米颗粒（IONPs）可被 DPSC 摄取并积累在溶酶体中。经筛选确定 50μg/mL IONPs 和 100mT 静磁场最适合 DPSC 增殖。NTA 分析显示，Mag-IVs 的颗粒浓度显著高于 IVs 和 DPSC-EVs，且 Mag-IVs 更容易被人毛乳头细胞（HHDPCs）摄取。
• DPSC 细胞囊泡对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的激活作用：体外划痕实验和血管生成实验表明，Mag-IVs 促进 HUVEC 迁移和血管生成的能力最强。Western Blot 和 ELISA 分析显示，Mag-IVs 组的血管内皮生长因子（VEGF）含量最高，这表明 Mag-IVs 在促进血管生成方面效果显著。
• 银耳多糖（TPS）对巨噬细胞极化的调节作用：研究发现 TPS 能够抑制巨噬细胞向 M1 表型极化，促进其向 M2 表型转化，从而调节毛囊周围的炎症微环境。通过免疫荧光、流式细胞术和 Western Blot 等实验均验证了这一结果。
• DPSC 细胞囊泡对 DHT 损伤的 HHDPCs 的协同保护作用：使用 DHT 建立 HHDPCs 损伤模型，结果显示 Mag-IVs 能显著减轻细胞损伤，促进细胞增殖，清除细胞内活性氧（ROS），减少细胞凋亡。Western Blot 实验进一步证实了 Mag-IVs 对细胞凋亡相关蛋白表达的调节作用。
• 可分离微针的制备与表征：基于聚乙烯吡咯烷酮（PVP）基质和 HA-TPS 的溶解性差异制备微针，确定 500mg/mL HA 加 150mg/mL TPS 为微针尖端材料的最佳选择。荧光显微镜观察证明 DPSC 细胞囊泡均匀分布在针尖，且微针具有足够的机械强度和良好的缓释能力。
• HTMI-MN 对小鼠毛发再生的治疗作用：体内实验表明，HTMI-MN 治疗组的毛囊在第 7 天进入生长期，毛发生长速度最快。组织学分析显示，该组毛囊数量更多、直径更大，Ki67 免疫组化染色证实其促进细胞增殖的作用。此外，HTMI-MN 还具有良好的抗炎效果，能有效改善局部微环境。

研究结论和讨论部分指出，细胞囊泡可通过多种途径改善毛囊微环境、促进毛发再生。Mag-IVs 产量高，在促进血管生成和拯救毛囊真皮乳头细胞凋亡方面表现出色，具有良好的应用潜力。HTMI-MN 在治疗 AGA 方面比临床常用的米诺地尔更有效且副作用更少，为 AGA 的治疗提供了一种新的有效方法。然而，Mag-IVs 治疗 AGA 的精确机制尚不清楚，微针在临床转化过程中还面临皮肤厚度差异、储存和监管等问题，有待进一步研究解决 。这项研究为雄激素性脱发的治疗开辟了新方向，为后续的临床应用和深入研究奠定了基础。