靶向 NETO2 抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移并失活 STAT3/C-MYC 通路：肝癌治疗新希望

《World Journal of Surgical Oncology》：Targeting NETO2 suppresses cell proliferation, invasion, and migration and inactivates the STAT3/C-MYC pathway in hepatocellular carcinoma

为探究 NETO2 在肝癌（HCC）中的作用及与 STAT3/C-MYC 通路的关系，研究人员开展了靶向 NETO2 对 HCC 细胞影响的研究。结果发现，NETO2 敲低可抑制 HCC 细胞增殖、侵袭和迁移并使 STAT3/C-MYC 通路失活，这表明 NETO2 是 HCC 潜在治疗靶点。

　　肝癌是全球范围内致命性极高的恶性肿瘤之一，每年全球约有 75.8 万人因肝癌死亡，中国更是有 31.7 万人因此丧生 ，其中肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）占据了大部分病例。由于 HCC 多数在晚期才被诊断出来，治疗手段有限，使得其死亡率居高不下。寻找新的、有效的 HCC 治疗靶点迫在眉睫，这不仅能为患者带来新的希望，也是医学领域亟待攻克的难题。

北京大学肿瘤医院内蒙古医院微创介入科等研究机构的研究人员针对这一问题，开展了以 “靶向 NETO2 抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移并失活 STAT3/C-MYC 通路” 为主题的研究。研究发现，NETO2 敲低能够抑制 HCC 细胞的增殖、侵袭和迁移，同时使 STAT3/C-MYC 通路失活。这一研究结果意义重大，为肝癌的治疗提供了新的潜在靶点，有望改善 HCC 患者的预后。该研究成果发表在《World Journal of Surgical Oncology》上。

研究人员开展研究时主要运用了以下关键技术方法：细胞培养技术，对 HCC 细胞（Huh7 和 MHCC-97H）进行培养；转染技术，将控制 siRNA（siCtrl）、NETO2 siRNA（siNETO2）、控制过表达（oeCtrl）、NETO2 过表达（oeNETO2）等转染到细胞中；qPCR 技术，用于检测相关基因的表达；蛋白质免疫印迹（Western blotting）技术，检测蛋白表达；EdU 染色、CCK-8 检测、TUNEL 检测、Transwell 侵袭实验和细胞划痕实验，分别用于评估细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力；此外还利用公共数据库 UALCAN 和 GEPIA 分析 HCC 数据。

研究结果如下：

• SiNETO2 转染效果：设计的 3 种 siRNAs 均有效抑制 NETO2 表达，其中 siNETO2-2 效果最佳，后续实验选用该 siRNA。转染 siNETO2 后，Huh7 和 MHCC-97H 细胞中 NETO2 的 mRNA 和蛋白表达均显著降低。
• 对细胞增殖的影响：通过 EdU 和 CCK-8 实验检测发现，转染 siNETO2 后，Huh7 和 MHCC-97H 细胞增殖能力下降。
• 对细胞凋亡的影响：TUNEL 实验表明，转染 siNETO2 后，MHCC-97H 细胞凋亡率显著增加，Huh7 细胞凋亡率有增加趋势但不显著。
• 对细胞侵袭和迁移的影响：Transwell 侵袭实验显示，转染 siNETO2 后，Huh7 和 MHCC-97H 细胞侵袭能力下降；细胞划痕实验表明，转染 siNETO2 后，Huh7 细胞迁移速率降低，MHCC-97H 细胞迁移速率变化不明显。
• 对 STAT3/C-MYC 通路的影响：Western blotting 结果显示，转染 siNETO2 后，Huh7 细胞中 p-STAT3 表达下调，MHCC-97H 细胞中 p-STAT3 表达略有下降，两种细胞中 C-MYC 表达均下调，说明 siNETO2 使 STAT3/C-MYC 通路失活。
• OeNETO2 的作用：转染 oeNETO2 后，Huh7 和 MHCC-97H 细胞中 NETO2 表达显著增加，同时细胞增殖和侵袭能力增强，细胞凋亡率降低。
• NETO2 表达的临床价值：根据 UALCAN 和 GEPIA 公共数据库分析，HCC 患者中 NETO2 表达高于正常对照组，且与肿瘤分期相关，但高 NETO2 表达患者与低表达患者的总生存率差异无统计学意义。

研究结论和讨论部分指出，NETO2 不仅在神经系统中发挥调节作用，在肿瘤生物学中也至关重要，它能够调节肿瘤细胞的活性和运动能力，并影响癌症预后。本研究证实，敲低 NETO2 可抑制 HCC 细胞增殖、侵袭和迁移，其机制可能是通过使 STAT3/C-MYC 通路失活，以及影响其他与肿瘤增殖相关的信号通路如 PI3K/AKT、ERK、Wnt 和 TGF-β 等实现的 。同时，过表达 NETO2 的实验进一步验证了 NETO2 对 HCC 细胞的作用。此外，研究还发现 NETO2 可能通过 IL9R、IL20、IL27RA 和 EBI3 调节 STAT3，但这一关系还需后续动物实验进一步验证。总之，该研究揭示了 NETO2 在 HCC 中的重要作用，为肝癌的治疗提供了新的潜在靶点和理论依据，对推动肝癌治疗领域的发展具有重要意义。