丹麦乳牛犊被动免疫转移水平评估：ELISA 与 Brix 折光仪的应用

《Acta Veterinaria Scandinavica》：Evaluation of passive immunity transfer in Danish dairy calves measured by enzyme-linked immunosorbent assay and Brix refractometer

为评估丹麦乳牛犊被动免疫转移水平，研究人员以 834 头 2 - 9 日龄犊牛为对象，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）和 Brix 折光仪检测。结果显示犊牛被动免疫水平较低，且 ELISA 和 Brix 折光仪检测结果高度相关。该研究为相关领域提供了参考。

　　在动物健康领域，小牛的健康成长一直是备受关注的话题。小牛刚出生时，体内缺乏免疫球蛋白，就像没有武装的士兵，急需从初乳中获取被动免疫来保护自己，抵御外界病菌的侵袭。然而，现实中存在诸多问题。一方面，目前对于小牛被动免疫转移失败（Failure of transfer of passive immunity，FTPI）和充足（adequate transfer of passive immunity，ATPI）的定义虽有标准，即血清免疫球蛋白 G（IgG）水平＜10mg/mL 为 FTPI，≥10mg/mL 为 ATPI，但近期研究又提出了新的分类和建议，且不同检测方法得到的结果差异较大。另一方面，常用的检测血清 IgG 水平的放射免疫扩散法（radial immunodiffusion，RID）虽被视为金标准，但存在耗时久、成本高的问题。而酶联免疫吸附测定（Enzyme - linked immunosorbent assay，ELISA）和 Brix 折光仪检测法具有操作简便等优势，却缺乏深入研究。因此，为了更准确地评估小牛被动免疫转移水平，优化检测方法，来自哥本哈根大学、奥胡斯大学等机构的研究人员开展了相关研究。

研究人员从 2018 年 9 月至 2019 年 11 月，在丹麦 83 个奶牛场选取 1002 头小牛进行研究，最终纳入 834 头（430 头公牛犊和 404 头母牛犊）2 - 9 日龄小牛的血样。在样本处理上，通过颈静脉穿刺采集血液，离心后分离血清，一部分用于 ELISA 检测血清 IgG 浓度，另一部分用数字 Brix 折光仪测量 % Brix。

在研究结果方面：

1. 血清 IgG 浓度和 % Brix 基本情况：血清 IgG 浓度中位数为 17.05mg/mL，% Brix 平均值为 8.5%。从免疫状态分类来看，592 份（71.0%）样本血清 IgG 浓度≥10mg/mL，242 份（29.0%）样本＜10mg/mL；541 份（64.9%）样本 % Brix≥8.1%，293 份（35.1%）样本＜8.1% 。这表明丹麦乳牛犊的被动免疫水平似乎较低，未达到新的建议标准。
2. 免疫状态分类占比：按照新的血清 IgG 水平分类（poor＜10mg/mL IgG、fair 10 - 17.9mg/mL IgG、good 18 - 24.9mg/mL IgG、excellent≥25mg/mL IgG）和 % Brix 分类（poor＜8.1、fair 8.1 - 8.8、good 8.9 - 9.3、excellent≥9.4），小牛在不同类别中的占比不同。其中，血清 IgG 浓度处于 poor、fair、good、excellent 类别的小牛分别占 29.0%、23.5%、22.3%、25.2%；% Brix 处于相应类别的小牛分别占 35.1%、30.9%、18.5%、15.5% 。
3. 相关性分析：血清 IgG 浓度与 % Brix 高度相关（r = 0.88），线性回归方程为 y = - 76.0440 + 11.1272x（R2 = 0.77） 。这进一步证实了 Brix 折光仪可作为农场可靠的检测工具。
4. 性别差异分析：研究发现，公牛犊和母牛犊在血清 IgG 浓度和 % Brix 方面无统计学显著差异，这意味着在丹麦，公牛犊和母牛犊的初乳管理可能没有普遍差异。

在研究结论和讨论部分，该研究表明丹麦乳牛犊的被动免疫水平低于其他地方报道和建议的水平。由于 ELISA 和 RID 检测的 IgG 值之间的相关性和差异不明确，直接将基于 RID 的临界值应用于 ELISA 检测的血清 IgG 值并不简单，在解释两者的比较结果时应谨慎。此外，不同研究中与 FTPI 对应的 % Brix 临界值差异较大。但总体而言，ELISA 和 % Brix 检测结果高度相关，且研究未发现犊牛 FTPI 状态存在性别差异。该研究为确定基于 ELISA 的 FTPI 临界值和相关建议提供了重要依据，有助于推动奶牛养殖中犊牛健康管理的发展，为优化犊牛免疫检测和管理策略提供了参考，具有重要的理论和实践意义。

研究人员开展此项研究用到的主要关键技术方法为：样本采集方面，从丹麦 83 个奶牛场选取 2 - 9 日龄的小牛，通过颈静脉穿刺采集血液样本；检测方法上，采用 ELISA 检测血清 IgG 浓度，利用数字 Brix 折光仪测量 % Brix；数据分析时，运用 Pearson 相关系数和简单线性回归进行统计分析。