TaqMan 定量 PCR 助力伊朗利什曼病模拟诊断:精准、高效新突破

《Journal of Parasitic Diseases》:Exploring the potential of Taq Man quantitative PCR for the simulated diagnosis of cutaneous and visceral leishmaniasis in clinical samples in Iran

【字体: 时间:2025年03月30日 来源:Journal of Parasitic Diseases

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  为解决利什曼病临床诊断中显微镜检查准确性有限和不便的问题,研究人员开展了利用 TaqMan 定量 PCR(qPCR)检测临床样本中皮肤和内脏利什曼病的研究。结果显示该方法灵敏度 96.3%、特异性 100.00% 、准确率 98.85%,对利什曼病诊断意义重大。

  利什曼病是一种被严重忽视的热带疾病,可能致使感染者死亡。临床诊断依赖经过培训的技术人员进行显微镜检查和寄生虫培养。显微镜分析的准确性有限且存在不便,可能导致利什曼病误诊和复发。因此,研究人员开发了一种基于动基体小环 DNA(mkDNA)基因的 TaqMan 定量 PCR(qPCR)方法,用于同时诊断临床样本中的皮肤和内脏利什曼病。研究共纳入 77 份皮肤病变样本、10 份犬血样本及吸出物,还有 65 份样本作为对照,这些样本均通过显微镜检查、体外培养前鞭毛体和 rK39 快速诊断试验进行了确认。通过 qPCR 对 mkDNA 基因进行分析,以确定该检测的检测限、灵敏度和特异性。结果显示,该检测的灵敏度为 96.3%(95% 置信区间 81.03 - 99.91%),特异性为 100.00%(95% 置信区间 94.04 - 100.00%),准确率为 98.85%(95% 置信区间 93.76 - 99.97%)。检测效率在 70% 至 97% 之间,R2值为 0.988。本研究建立的 qPCR 检测方法是诊断皮肤和内脏利什曼病的有力工具。与寄生虫检查相比,它操作更简便,节省时间且降低了污染风险,有助于伊朗这一流行地区进行利什曼病的临床监测和发病率测定,也为其他研究人员在伊朗探索商业化 TaqMan 实时 PCR 诊断试剂盒奠定了基础。

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