阿利塞替布联合GPC3 DNA疫苗通过增强树突状细胞介导的CD8+T细胞免疫应答抑制肝癌生长

本刊推荐：针对肝癌免疫治疗中疫苗单药疗效受限的难题，蚌埠医学院团队创新性将Aurora A激酶抑制剂阿利塞替布(alisertib)与靶向GPC3的DNA疫苗联用。研究发现该联合方案通过促进CD8+CD11c+树突状细胞成熟及抗原提呈，显著增强肿瘤特异性CD8+T细胞应答，在皮下和原位肝癌模型中均展现显著抑瘤效果，并诱导长效免疫记忆。该研究为肝癌联合免疫治疗提供了新策略，发表于《iScience》。

　　

肝癌作为全球高发恶性肿瘤，传统治疗手段面临疗效瓶颈。近年来，以肿瘤疫苗为代表的免疫疗法虽展现出潜力，但单药治疗常因肿瘤免疫逃逸机制导致应答率有限。其中，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)作为肝癌特异性抗原备受关注，但临床数据显示GPC3肽疫苗单药疗效不足30%。与此同时，靶向细胞周期调控蛋白Aurora A激酶的小分子抑制剂阿利塞替布(alisertib)在血液肿瘤和实体瘤中显示出独特免疫调节作用，但其与肿瘤疫苗的协同效应尚属未知。这一科学问题激发了蚌埠医学院薛芳、张静团队的研究兴趣。

为突破肝癌免疫治疗瓶颈，该团队在《iScience》发表了创新性研究成果。研究人员首先构建了分泌型GPC3 DNA疫苗(pGPC3)，通过PLGA/PEI纳米颗粒递送系统实现高效抗原表达。通过皮下和原位肝癌模型，系统评估了alisertib与pGPC3疫苗联用的抗肿瘤效果及免疫机制。

研究采用多学科技术方法：通过流式细胞术分析免疫细胞亚群动态变化，ELISA检测细胞因子分泌谱，ELISPOT评估抗原特异性T细胞应答，CTL实验量化细胞毒性，并建立CD4⁺/CD8⁺T细胞清除模型验证关键效应细胞。特别值得注意的是，研究同时采用了皮下移植瘤和更接近临床的原位肝癌模型，增强了转化医学价值。

研究结果部分呈现了系统性发现：

1. 疫苗抗原表达与治疗安全性：pGPC3转染的293T细胞GPC3表达率提升4倍，血清抗原水平显著升高。联合治疗组未出现体重下降或器官病理损伤，IL-6短暂升高后恢复正常，证实方案安全性。

2. 协同抑瘤效应：联合组皮下瘤完全缓解率达60%，显著高于单药组。肿瘤重量分析显示联合组抑瘤率提升2.3倍。流式检测发现肿瘤内CD8⁺T细胞浸润增加42%，而Tregs比例下降35%。

3. 免疫机制解析：联合治疗显著促进CD8⁺CD11c⁺DC亚群扩增（脾脏中增加2.1倍），并上调CD80/CD86/MHC分子表达。关键的是，CD8⁺T细胞清除完全取消治疗效果，而CD4⁺T细胞清除影响有限。

4. 长效免疫记忆：治愈小鼠再次接种肿瘤后，40%联合组小鼠保持无瘤状态。记忆表型分析显示效应记忆T细胞(T_EM)比例提升3倍，这与70天100%的生存率密切相关。

5. 原位模型验证：在更临床相关的原位肝癌模型中，联合组90天生存率达90%，肝组织病理显示肿瘤结节减少78%，且肿瘤浸润IFN-γ⁺CD8⁺T细胞增加2.5倍。

讨论部分深入阐释了科学意义：该研究首次揭示alisertib可通过双重机制增强疫苗疗效——一方面通过抑制Aurora A激酶诱导肿瘤细胞免疫原性死亡，增加抗原释放；另一方面直接促进DC成熟和抗原提呈。特别有价值的是，联合方案成功将"冷肿瘤"转化为"热肿瘤"，克服了PD-L1上调带来的免疫抑制。研究者同时指出，alisertib可能通过抑制Aurora B激酶激活cGAS-STING通路，这为后续机制研究提供了方向。

该研究的转化价值体现在三方面：临床可及性（alisertib为临床阶段药物）、方案普适性（DNA疫苗易于规模化生产）、疗效全面性（同时获得即时抑瘤和长期免疫保护）。团队也客观指出需在晚期肿瘤模型和患者来源异种移植(PDX)模型中进一步验证，这些正是后续研究的重点方向。

这项工作的创新性在于巧妙结合靶向治疗与主动免疫策略，为肝癌联合治疗提供了新范式。其发现不仅适用于肝癌，也为其他GPC3阳性肿瘤（如肝母细胞瘤、黑色素瘤）的治疗开辟了新思路。随着个体化医疗发展，该方案有望与PD-1抑制剂等形成三联方案，进一步提升肝癌免疫治疗响应率。