一种来自甲酸乙酸梭菌的嗜温性核酸内切酶 CfAgo：小 DNA 引导下高效切割 DNA 的新工具

为探索新型核酸内切酶用于 DNA 操作的可能性，研究人员对来自嗜温菌甲酸乙酸梭菌（Clostridium formicaceticum ）的 CfAgo 进行研究。结果显示，CfAgo 具 DNA 引导的核酸内切酶活性，能在特定条件下切割双链 DNA。这为核酸检测和切割等操作提供了新工具。

　　研究对来自嗜温菌甲酸乙酸梭菌（Clostridium formicaceticum）的一种新的核酸内切酶（pAgo）CfAgo 进行了表征。CfAgo 拥有 DNA 引导的 DNA 内切酶活性，能在标准位点切割 DNA 靶点。它在 28°C 到 75°C 的温度范围内都有活性，偏好 5′端带磷酸基团且首位核苷酸为胸腺嘧啶（T）的 DNA 引导链。引导链的种子区、中间区和 3′端补充区出现单核苷酸错配时，切割活性会降低，5′羟基化（5′OH）引导链比 5′磷酸化（5′P）引导链对错配的识别能力更强。此外，结构分析表明，CfAgo 的 MID 结构域对识别 5′引导链至关重要，且影响结合特异性。在 Mn²⁺和 Mg²⁺离子存在、合适盐浓度条件下，CfAgo 能催化 AT 富集区域双链 DNA 的可编程切割。这些特性使 CfAgo 有望成为核酸检测、切割等 DNA 操作的有力工具。