储存时间和温度对健康个体凝血因子及天然抗凝物质活性的影响：精准检验的关键探索

《Scientific Reports》：Effects of storage time and temperature on coagulation factor and natural anticoagulant activities in healthy individuals

在凝血检验中，样本储存条件影响结果准确性。研究人员开展 “储存时间和温度对凝血因子（FII、FV 等）及天然抗凝剂（抗凝血酶、蛋白 C 等）活性影响” 的研究。结果显示不同因子和抗凝剂稳定储存时间与温度各异，这为临床精准检验提供了重要依据。

　　在医疗检验领域，凝血检验结果对于疾病诊断和治疗决策至关重要。然而，目前存在诸多问题，如临床样本储存条件对凝血检验结果影响尚不明确，现有指南中关于凝血因子和天然抗凝剂活性样本储存时间的证据有限，不同研究的结论也存在差异，这使得临床检验的准确性难以保证，可能导致错误诊断和治疗，影响患者预后。为了解决这些问题，Sysmex Corporation（日本神户）的研究人员开展了关于储存时间和温度对凝血因子（FII、FV、FVII、FX、FVIII、FIX、FXI、FXII、FXIII）和天然抗凝剂（抗凝血酶^AT、蛋白 C^PC、游离蛋白 S^{Free PS}）活性影响的研究。该研究成果发表在《Scientific Reports》上，对于规范临床样本储存、提高凝血检验准确性具有重要意义。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：招募 78 名健康内部志愿者提供血液样本（样本队列来源），通过离心制备血浆样本；使用显色法检测 FVIII、FXIII、AT、PC、Free PS，用凝固法检测 FII、FV、FVII、FX、FIX、FXI、FXII；利用重复测量方差分析评估数据差异的统计学意义。
研究结果如下：

1. 不同储存条件下凝血因子和天然抗凝剂稳定性趋势：研究对比了样本在室温、冷藏、冷冻条件下储存不同时间后各因子和抗凝剂活性相对于基线值的变化，结果通过趋势图呈现。
2. 室温及冷藏储存情况：除 FVIII 外，其他因子和天然抗凝剂在室温或冷藏储存时，活性变化在研究时间内大多小于 15%。FVIII 在室温或冷藏储存时稳定性较差，室温储存超 2 小时、冷藏超 4 小时，其活性变化超 15%。进一步研究发现，室温储存 3 小时、冷藏储存 4 小时内，FVIII 活性变化小于 15%12。
3. 冷冻储存情况：在 - 15℃至 - 25℃冷冻储存时，除 FV 和 FVIII 外，其他因子和抗凝剂活性变化大多小于 15%。FV 和 FVIII 稳定性较低，FV 冷冻超 1 个月、FVIII 超 2 个月，活性变化超 15%。而在 - 75℃至 - 85℃冷冻储存时，FV 和 FVIII 在 1 - 4 个月内活性变化均小于 15%34。
   研究结论和讨论部分指出，不同凝血因子和天然抗凝剂的可接受储存时间和温度各不相同。对于 FVIII，其在室温下的可接受储存时间比 CLSI H21-ED6 指南推荐的更短。在冷冻储存方面，-15℃至 - 25℃储存不适用于 FV 和 FVIII 活性检测，建议在检测 FV 和 FVIII 活性时，若样本冷冻，应存于深冻冰箱（-75℃至 - 85℃）。此外，研究还获得了关于 FXIII、AT、PC、Free PS 在不同储存条件下的新见解，这些物质在研究的时间范围内保持稳定。但该研究存在局限性，如样本来自有限数量的健康个体、仅使用一种检测方法、为单中心研究等，后续需多中心研究进一步验证。总体而言，该研究为临床实践中控制样本储存条件、提供准确测量数据提供了重要参考，有助于提高凝血检验的准确性，进而提升临床诊断和治疗水平。