一种改进的、具有统计学可重复性的洗衣用抗菌配方筛选方法：对 BSI EN 17658 标准的适应性优化

《Scientific Reports》：An enhanced, statistically repeatable method for screening antimicrobial formulations in laundry applications, an adaptation of BSI EN 17658

在全球致力于降低能源消耗和减少使用对环境及公众健康有负面影响化学品的大背景下，家用洗衣抗菌性能评估方法的可靠性亟待提升。研究人员改进 BSI EN 17658 标准，开发增强通量方法（ETP）。结果显示，ETP 与原标准结果无显著差异且重复性更好。这为研究筛选提供了高效工具。

　　在全球倡导节能减排、减少有害化学品使用的浪潮中，家用洗衣领域正经历深刻变革。新型洗衣机追求节水、短周期、低温洗涤，这就对与之适配的环保型洗衣洗涤剂和添加剂提出了更高要求，它们不仅要能高效去污，还要具备良好的抗菌性能。在此背景下，可靠的抗菌性能评估方法成为监管、研究和产品筛选的关键需求。

2022 年，欧洲标准化委员会（CEN）发布了 BSI EN 17658:2022 标准，用于评估家用洗衣化学产品的抗菌活性。该标准虽比之前的协议有所进步，但使用的 Rotawash 设备存在成本高、体积大、操作繁琐等问题，在研究多配方和多测试条件时效率低下。为解决这些问题，Arxada LLC 等机构的研究人员开发了一种改进的方法 —— 增强通量方法（Enhanced Throughput Method，ETP），相关研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员开展此项研究时，采用了多种关键技术方法。他们选用 Rotisserie analog（Scilogex）和无菌 50ml falcon 管模拟实验室规模设备和洗衣滚筒；通过调整微生物悬浮液浓度、设置不同处理组和对照组进行实验；运用多种统计分析方法，如 ANOVA、t 检验等对实验数据进行处理和比较 。

研究结果如下：

• 研究重复和暴露条件：对包括铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、粪肠球菌（Enterococcus hirae）和白色念珠菌（Candida albicans）在内的微生物进行测试，处理溶液为浓度 400ppm（0.04%）的活性十二烷基二甲基氯化铵（DDAC），在 1:5 的载液比下翻滚 15 分钟，孵育后加入中和溶液，按规定进行微生物计数分析1。
• ETP 对照：除白色念珠菌和大肠杆菌接种物外，ETP 测试中 N、N₀和 N₀-N_w的控制数在 EN 标准要求范围内，N₀控制数据的重复性标准偏差表明对照的重现性良好2。
• 机械作用：ETP 方法通过选用 50mL falcon 管、设置旋转速度为 40rpm 等操作，维持了与原标准相似的机械作用。额外测试计算的 N₀-N_w值与环试数据可比，表明其机械作用与 Rotawash 罐相当3。
• 基准 0.04% DDAC 处理的比较功效：ETP 和 EN 方法测试的平均 log 减少值（LR）在统计学上无显著差异，但 ETP 的重复性更好，即其 LR 的标准偏差（S_r）更小4。
• 研究配方的比较功效：用 ETP 和完整 EN 方法测试研究配方，结果显示该配方对铜绿假单胞菌无效，ETP 和完整方法的平均 LR 数据范围分别为 2.26 - 4.33 和 2.45 - 4.545。

研究结论和讨论部分指出，ETP 方法在保持与原标准机械作用和载液比一致的前提下，简化了测试流程，提高了通量。虽然 ETP 方法存在检测限较高、未考虑洗水和交叉污染对照、不适用于 40°C 以上洗涤循环研究等不足，但它避免了交叉污染，能更准确评估抗菌剂对单个微生物的功效，且与国际环试数据无显著差异，重复性更好。因此，ETP 方法可作为一种实用、经济高效的家用洗衣实验配方筛选工具，为相关研究和产品开发提供有力支持。