KLX：开启肝癌治疗新篇章 —— 通过调控 ZBP1 介导 PANoptosis 抑制肝癌进展

《Acta Pharmacologica Sinica》：KLX ameliorates liver cancer progression by mediating ZBP1 transcription and ubiquitination and increasing ZBP1-induced PANoptosis

肝癌严重威胁人类健康，现有治疗手段存在诸多局限。为寻找新疗法，研究人员开展关于新型蒽醌衍生物康 lexin（KLX）治疗肝癌的研究。结果发现 KLX 能抑制肝癌细胞增殖、迁移，促进 PANoptosis。这为肝癌治疗提供了新策略，具有重要意义。

　　肝癌，这个隐匿在人体内部的 “杀手”，严重威胁着人类的生命健康。全球范围内，肝癌的发病率和死亡率都居高不下，它就像一座难以翻越的大山，横亘在医学研究的道路上。目前的治疗手段，诸如肝移植、免疫疗法和基因疗法等，都因晚期诊断困难和显著的副作用而受到极大限制。肝癌患者的生存率依旧不容乐观，这迫切需要医学研究者们找到新的突破点，研发出更有效的治疗药物。

在这样的背景下，哈尔滨医科大学和北京中医药大学的研究人员挺身而出，开展了一项意义非凡的研究。他们将目光聚焦于一种新型蒽醌衍生物 —— 康 lexin（KLX），试图探究它对肝癌的治疗潜力。研究结果令人振奋，KLX 展现出了强大的抗癌能力，它能有效抑制肝癌细胞的增殖和迁移，显著抑制肿瘤生长，且毒性较低。这一发现为肝癌的治疗带来了新的曙光，相关研究成果发表在《Acta Pharmacologica Sinica》上。

为了开展这项研究，研究人员运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，利用 Cell Counting Kit-8（CCK-8）、EdU 染色、集落形成等实验检测细胞增殖，通过 Transwell 实验和伤口愈合实验评估细胞迁移能力。同时，借助蛋白质免疫印迹（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）等技术检测相关蛋白和基因的表达水平。在动物实验中，构建了裸鼠异种移植瘤模型，以此来观察 KLX 对肿瘤生长的影响 。

研究结果如下：

• KLX 抑制肝癌细胞增殖和迁移：CCK-8 实验表明，KLX 能显著降低 HepG2 和 Hep3B 细胞活力，其半数抑制浓度（IC₅₀）分别为 53.54 μM 和 63.07 μM。EdU 和集落形成实验进一步证实，KLX 可剂量依赖性地抑制细胞增殖。伤口愈合实验和 Transwell 实验则显示，KLX 能显著抑制肝癌细胞的迁移。
• KLX 诱导肝癌细胞发生 PANoptosis：使用细胞死亡抑制剂处理后，CCK-8 实验发现，pan-caspase、pyroptosis 和 necroptosis 通路参与了 KLX 诱导的细胞死亡过程，这表明 PANoptosis 可能发挥作用。qPCR 和 Western blot 分析显示，KLX 能显著上调 PANoptosome 组件 ZBP1、AIM2 和 RIPK1 的表达，同时调节凋亡、pyroptosis 和 necroptosis 相关标记物的表达，这说明 KLX 通过上调 ZBP1 表达诱导肝癌细胞发生 PANoptosis。
• KLX 直接结合 ZBP1 并抑制其泛素化：表面等离子共振（SPR）实验和分子对接模拟表明，KLX 与 ZBP1 具有较强的结合亲和力。DARTS 和 CETSA 分析证实，KLX 能抑制 ZBP1 降解。Co-IP 实验发现，KLX 可剂量依赖性地降低 ZBP1 的泛素化水平，分子动力学模拟和 Co-IP 实验进一步表明，KLX 通过抑制 ZBP1 与 E3 泛素连接酶 RNF180 的相互作用，增加 ZBP1 的稳定性。
• KLX 通过调节 HOXD10 调控 ZBP1 转录活性：敲低 HOXD10 后，ZBP1 的 mRNA 和蛋白水平显著降低，而过表达 HOXD10 则会增加 ZBP1 的表达。荧光素酶报告基因实验证实，ZBP1 是 HOXD10 的直接靶标，且 KLX 主要通过增加 HOXD10 介导的 ZBP1 转录来发挥作用。
• KLX 通过 ZBP1 抑制肝癌进展：过表达 ZBP1 可抑制肝癌细胞的增殖和迁移，促进细胞凋亡。敲低 ZBP1 则能逆转 KLX 对肝癌细胞的抑制作用，这表明 KLX 通过上调 ZBP1 促进肝癌细胞死亡并抑制其迁移。
• KLX 抑制肝癌肿瘤生长：在裸鼠异种移植瘤模型中，KLX 能剂量依赖性地抑制肿瘤生长，且对小鼠体重无明显影响，而阳性对照奥沙利铂（OXA）则导致小鼠体重显著下降。同时，KLX 对肿瘤组织中 PANoptosis 相关蛋白的影响与细胞实验结果一致。

研究结论和讨论部分指出，KLX 是一种新型化合物，它通过促进肝癌细胞发生 PANoptosis 来抑制肝癌进展。研究首次揭示了 ZBP1 在肝癌细胞中的功能，以及 HOXD10 对 ZBP1 转录的调控作用。与传统治疗药物奥沙利铂相比，KLX 具有更强的抗癌效果和更低的毒性。此外，KLX 还具有心脏保护等多种功能，这可能与其独特的化学结构和作用机制有关。不过，KLX 调节 HOXD10 表达的具体机制仍有待进一步研究。

这项研究意义重大，它为肝癌的治疗提供了一种全新的、高效且低毒的治疗药物 KLX，为肝癌患者带来了新的希望。同时，研究也为深入理解肝癌的发病机制和治疗靶点提供了重要的理论依据，有望推动肝癌治疗领域的进一步发展 。