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在衰老生物学研究中,精确追踪秀丽隐杆线虫(C. elegans)行为对研究衰老至关重要,但现有追踪系统存在诸多问题。研究人员开发 WormRACER 软件,可同时追踪多个线虫多种运动指标,分析速度快,结果与商业产品可比,为相关研究提供了有力工具。
在生命科学的微观世界里,小小的秀丽隐杆线虫(C. elegans)成为了科研人员探索衰老奥秘的重要模型。动物行为研究一直是生物学领域的重要课题,它帮助人们理解动物如何感知和应对环境变化。然而,动物行为复杂多样,从个体层面记录分析就颇具挑战,到了群体层面更是难上加难。以往手动记录分析的方式不仅耗费大量时间精力,还缺乏准确性。
随着科技发展,自动化记录和计算技术兴起,秀丽隐杆线虫研究也从中受益。在衰老生物学研究中,线虫和人类一样,随着年龄增长,其 mobility(移动能力)会下降,而移动能力又与老年人的生活质量息息相关。所以,精确且高效地追踪线虫行为表型,对研究衰老至关重要。
为了更好地解决这些问题,来自美国南加州大学伦纳德?戴维斯老年学学院(Leonard Davis School of Gerontology, University of Southern California)的研究人员 Bennett T. Van Camp、Quinn N. Zapata 和 Sean P. Curran 开展了一项研究。他们开发了一款名为 Worm Robust Analysis by Computer-Enhanced Recording(WormRACER)的软件。
研究人员在开发 WormRACER 时,充分考虑了多个影响线虫追踪的关键因素。例如,可追踪动物数量、实验环境、碰撞追踪以及软件和硬件的依赖等问题。在算法设计上,WormRACER 能并行处理视频帧,快速识别和追踪线虫轮廓,还能检测碰撞,碰撞时暂停数据收集,待线虫分开后重新开始,并为线虫分配新的 ID。
研究结果表明,WormRACER 具有诸多优势。在效率方面,与商业追踪器 Tracker WL 相比,分析速度大幅提升,分析含有 17 条线虫的爬行视频时,WormRACER 比 Tracker WL 快 10 倍;分析含有 49 条线虫的视频时,快 34 倍,且所有测试视频用 WormRACER 分析都在 1 分钟内完成。在分析结果上,WormRACER 与 Tracker WL 在部分指标上结果可比,如成年 1 天(Day 1 adult)线虫的虫体面积和爬行速度,L4 期线虫的爬行速度和波起始率等;不过在一些指标上也存在细微差异,如成年 1 天线虫的虫体长度、游泳速度、动态幅度和波起始率,以及 L4 期线虫的虫体面积、虫体长度、游泳速度和动态幅度等。此外,WormRACER 在多种显微镜上都能正常工作,并且对不同发育阶段的线虫,包括 D6 期成年线虫都能成功追踪。
研究结论和讨论部分指出,WormRACER 是一款计算高效的计算机视觉软件,能快速量化线虫的六种生理指标,还能同时追踪多个线虫,受视野限制较小。它操作简单,对硬件要求低,分析速度快,为衰老生物学研究提供了新的有力工具。同时,该软件也有潜力应用于其他生物的二维运动分析,进一步拓展其应用范围。
研究人员为开展这项研究,主要用到了以下关键技术方法:
图像分析技术 :利用开发的软件对显微镜拍摄的线虫视频进行处理,提取线虫的轮廓、长度、速度等多种运动指标。
多线程并行处理技术 :软件通过多线程并行处理视频帧和线虫轮廓,提高分析速度。
碰撞检测技术 :软件能够检测线虫之间的碰撞,并在碰撞时暂停数据收集,待线虫分开后重新开始追踪和数据收集。
总之,WormRACER 的出现,为秀丽隐杆线虫相关研究去除了效率和硬件方面的障碍,推动了衰老生物学等领域的发展,也为其他生物运动分析研究提供了新思路和方法。
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