RORα 精准调控肝脏代谢昼夜节律：肥胖与血脂异常防治新靶点

《Scientific Reports》：RORα fine-tunes the circadian control of hepatic triglyceride synthesis and gluconeogenesis

为探究 RORα 对肝脏脂质代谢的影响，法国研究人员以 RORα 基因敲除（sg/sg）小鼠为模型，研究肝脏甘油三酯（TG）合成及糖异生的昼夜变化。结果发现 RORα 缺失影响肝脏 TG 合成和核心时钟基因表达。该研究为防治代谢疾病提供了新方向。

　　在人体这个复杂的 “小宇宙” 里，代谢过程就像一场有序的交响乐，而昼夜节律则是那精准的指挥家。众多研究表明，代谢与昼夜节律紧密相连，它们共同维持着身体的健康平衡。在这个 “指挥系统” 中，核受体 RORα 扮演着重要角色，参与昼夜节律调节，还与脂质和葡萄糖代谢密切相关。此前研究发现，RORα 基因敲除（sg/sg）小鼠代谢表型有所改善，这让人们看到了通过调节 RORα 防治代谢疾病的希望。但问题也接踵而至，RORα 究竟如何影响肝脏脂质代谢的昼夜变化？在这一过程中，它与核心时钟基因又有着怎样的互动？这些谜题亟待解开。

为了攻克这些难题，法国索邦大学 - 法国国家健康与医学研究院（Sorbonne Université-Inserm）的研究人员挺身而出，展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Scientific Reports》上，为我们揭示了其中的奥秘。

研究人员在此次研究中，主要运用了基因敲除技术、转录和蛋白质分析技术以及代谢功能检测技术。他们以 RORα 基因敲除的 sg/sg 小鼠为研究对象，同时设置野生型（WT）小鼠作为对照。通过对小鼠肝脏组织的 mRNA 提取、逆转录和定量 PCR，检测相关基因的表达水平；利用蛋白质免疫印迹分析技术，测定蛋白质的含量和变化。此外，还通过检测放射性标记底物掺入 TG 的情况，评估肝脏脂质合成功能；借助丙酮酸耐受试验，考察糖异生能力。

研究结果显示：

• sg/sg 小鼠代谢参数改善：sg/sg 小鼠全天的肝脏 TG 含量、血浆 TG 和葡萄糖浓度均低于 WT 小鼠，且昼夜节律波动幅度更小，这表明 RORα 缺失改善了脂质和葡萄糖稳态的昼夜变化。
• 肝脏 TG 合成受影响：在肝脏 TG 合成过程中，sg/sg 小鼠在光期的甘油酮生成（GNG）、糖酵解和从头脂肪生成均受到抑制。例如，在 ZT10 时，GNG 功能下降，PEPCKc 蛋白表达减少；ZT4 时，葡萄糖掺入 TG 的量显著降低，糖酵解限速酶 L-PK 蛋白含量减少；ZT6 时，乙酸掺入 TG 的量大幅下降，脂肪生成关键蛋白 ACC 和 FAS 水平降低。这说明 RORα 缺失导致肝脏 TG 合成在光期受到多途径抑制。
• 核心时钟基因表达异常：RORα 缺失影响了核心时钟基因的表达。Bmal1、Clock 和 Cry1 转录水平降低，Bmal1 转录峰值延迟 4 小时；Reverbα 转录和蛋白表达均出现 4 小时的相位偏移，且蛋白表达幅度减弱。RORγ 转录峰值在夜间延长，蛋白含量增加。这表明 RORα 对维持核心时钟基因的正常节律表达至关重要。
• 脂肪生成转录因子节律紊乱：在 sg/sg 小鼠中，参与脂肪生成调控的转录因子表达节律出现紊乱。光期 Srebp1c 和 LXRα 基因表达下降；夜间 Chrebpα mRNA 提前达到峰值，Srebp1c 和 LXRα 转录本短暂过表达，但由于 Insig1 和 Insig2 蛋白提前增加，抑制了 pSrebp1c 向 mSrebp1c 的成熟转化，导致脂肪生成并未增加。
• 药物干预效果显著：使用 RORα 反向激动剂 SR3335 处理 WT 小鼠，可模拟 sg/sg 小鼠的代谢变化，降低肝脏和血浆 TG 含量，抑制肝脏脂质合成和糖异生；而 RORα 激动剂 SR1078 则产生相反的效果。这进一步证实了 RORα 在肝脏代谢中的重要调节作用。

研究结论表明，RORα 在肝脏脂质和葡萄糖代谢的昼夜调节中起着关键作用。它通过影响核心时钟基因的表达，进而调控 Srebp1c、FAS、ACC、PKL 和 PEPCKc 等基因的转录，精细调节脂肪生成。从机制上看，RORα 蛋白具有明显的昼夜节律性，其缺失会导致 Bmal1 和 Reverbα 表达相位偏移，进而扰乱 Srebp1c/Insigs 通路。此外，RORα 还能抑制 LXRα 转录，间接控制 Srebp1c 表达和脂肪生成。

这项研究意义重大，它为深入理解肝脏代谢的昼夜调控机制提供了新的视角，明确了 RORα 作为潜在治疗靶点的重要性。在防治代谢疾病方面，研究提示通过药物调节 RORα 活性可能是预防肥胖、血脂异常等疾病的有效策略。但同时，研究也指出，RORα 的调节作用在不同饮食和病理背景下存在差异，这为后续研究指明了方向，有助于开发更精准、有效的代谢疾病治疗方案。