Pritumumab：跨越血脑屏障的肿瘤免疫治疗新希望

《Scientific Reports》：Characterization of pritumumab in murine models and primate safety study

在肿瘤免疫治疗中，单克隆抗体疗法面临识别独特肿瘤生物标志物、克服细胞毒性等挑战。研究人员针对 CHO 细胞衍生的 pritumumab 开展研究，发现其能抑制肿瘤生长、穿越血脑 / 血瘤屏障且安全，为肿瘤免疫治疗提供新方向。

　　在肿瘤治疗的漫长探索道路上，免疫疗法宛如一颗新星，吸引着众多科研人员的目光。然而，单克隆抗体（mAb）疗法在用于实体瘤治疗时却困难重重。比如，难以识别肿瘤独特的生物标志物，无法有效克服细胞毒性，肿瘤穿透性差以及全身分布不理想等问题，都像一道道关卡，阻碍着免疫疗法发挥更大的作用。因此，寻找更有效的肿瘤治疗方法迫在眉睫。

为了突破这些困境，来自美国多个研究机构（CureScience Institute、University of California, San Diego 的 Moores Cancer Center、Memorial Sloan-Kettering Cancer Center、Saint John’s Health Center 等）的研究人员，对一种名为 pritumumab 的人 IgG1κ 抗体展开了深入研究。这项研究成果发表在《Scientific Reports》上，为肿瘤免疫治疗带来了新的曙光。

研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。在细胞和动物实验方面，使用多种细胞系（如 U251-MG、PANC-1 等）建立了异种移植小鼠模型和颅内肿瘤小鼠模型。利用正电子发射断层扫描（PET）成像技术，结合生物分布分析，来评估 pritumumab 在体内的分布情况。通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性（ADCC）实验，检测 pritumumab 的抗癌活性。还运用了流式细胞术（FACS）、免疫组织化学染色等技术，研究 pritumumab 与肿瘤细胞的结合情况 。

研究结果如下：

• CHO 细胞衍生 pritumumab 的特性：通过分析癌症基因组图谱（TCGA）数据集，发现胶质母细胞瘤（GBM）中波形蛋白（vimentin）基因表达显著增加。FACS 分析显示，新（CHO 衍生）旧（杂交瘤衍生）两种 pritumumab 都能与 A549 细胞结合且识别相同表位，ADCC 实验表明 CHO 细胞产生的 pritumumab 在 PANC1 和 SF188 细胞中具有细胞毒性，其半数有效浓度（EC₅₀）为 20μg/ml，且 pritumumab 对癌细胞组织有强亲和力，对正常组织无染色12。
• pritumumab 在小鼠模型中的生物分布：将 pritumumab 与去铁胺（DFO）结合并标记锆 - 89（⁸⁹Zr）后进行 PET 成像研究。结果显示，⁸⁹Zr -DFO - pritumumab 能在植入的肿瘤中积累并优先保留，从非靶器官清除，肿瘤与背景的比值随时间增加，在给药 24 小时后肿瘤可清晰显像，生物分布研究也证实了其在肿瘤部位的聚集3。
• pritumumab 在异种移植裸鼠模型中的作用效果：在 U251 胶质母细胞瘤和 PANC-1 胰腺癌细胞系的异种移植裸鼠模型中，pritumumab 治疗组的肿瘤生长受到显著抑制（U251 模型中 p=0.00001，PANC-1 模型中 p=0.00001），实验结束时，治疗组肿瘤重量也明显更低（PANC-1 模型中 p=0.0026）4。
• pritumumab 跨越血脑 / 血瘤屏障的检测：在颅内肿瘤小鼠模型中，注射 Pritumumab - Alexa647 抗体后观察发现，在正常脑区，抗体大多在正常完整血管内，而在肿瘤区，抗体主要在肿瘤血管外，表明新的 CHO 衍生 pritumumab 能跨越血脑 / 血瘤屏障，靶向人源肿瘤且对正常小鼠组织无明显交叉反应5。
• 食蟹猴的药代动力学等效性和毒代动力学参数研究：对不同剂量（10、20 和 50mg/kg）pritumumab 注射的食蟹猴进行研究，发现血浆中 pritumumab 浓度随剂量增加而增加，消除缓慢且呈线性剂量比例关系，性别对毒代动力学参数无明显影响，29 天静脉注射后无明显毒性作用6。

研究结论和讨论部分指出，CHO 衍生的 pritumumab 具有良好的结合、安全性和生物活性，其靶点 ecto - domain vimentin（EDV）是上皮肿瘤可行的免疫治疗靶点，这为正在进行的临床试验提供了坚实的基础。pritumumab 作为一种天然存在的抗体，展现出免疫系统对肿瘤抗原的监视和自然抗体反应。尽管正常波形蛋白与 EDV 氨基酸序列相同，但 pritumumab 不识别正常细胞来源的波形蛋白，可能是因为其识别的 EDV 表位是由表观遗传修饰产生的。鉴于 EDV 在多种实体瘤中表达，pritumumab 有望成为多种实体上皮癌的潜在治疗药物，未来有效的治疗方案可能会将 pritumumab 作为抗体组合的一部分 。这项研究为肿瘤免疫治疗开辟了新的方向，让人们看到了 pritumumab 在肿瘤治疗领域的巨大潜力，为攻克肿瘤难题带来了新的希望。