解析拟南芥组织转录组与翻译组:解锁基因表达调控密码

【字体: 时间:2025年03月26日 来源:Scientific Data 5.8

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  为解决植物细胞翻译水平研究困难、相关数据集有限的问题,研究人员开展拟南芥幼苗根和芽转录组(RNA-Seq)和核糖体足迹(Ribo-Seq)对比研究。结果提供了蛋白编码 mRNA 的翻译适应性信息,有助于全面了解基因表达调控水平,意义重大。

  在生命科学的奇妙世界里,基因表达调控一直是科研人员重点关注的领域。基因表达就像一场精密的交响乐演奏,转录和翻译是其中关键的乐章。转录过程在如今借助高通量技术,如微阵列和 mRNA 测序(RNA-Seq),已能实现高精度测量,可翻译过程的研究却困难重重。在植物研究中,这一问题更为突出。蛋白质作为生命活动的主要执行者,其合成过程 —— 翻译,不仅消耗大量能量,还受到复杂的调控。在植物面对环境变化时,翻译调控的精准决策至关重要,但由于技术限制,植物细胞全基因组范围内的翻译景观研究进展缓慢。同时,蛋白质组学研究存在局限性,难以检测不稳定和低丰度蛋白质,且蛋白质稳态浓度受翻译速率和稳定性双重影响,导致难以准确推断转录本的翻译速率。此外,植物中转录本和蛋白质丰度之间的差距较大,翻译调控在植物基因表达调控中的作用亟待深入探究。为了解开这些谜团,来自中国台湾 “中央研究院” 植物暨微生物学研究所(Institute of Plant and Microbial Biology, Academia Sinica)等机构的研究人员开展了一项针对拟南芥(Arabidopsis thaliana)的研究。这项研究成果发表在《Scientific Data》上,为植物基因表达调控研究带来了新的曙光。
研究人员主要运用了 RNA-Seq 和 Ribo-Seq 两项关键技术。RNA-Seq 用于测定总 RNA,获取转录本信息;Ribo-Seq 则是在细胞裂解后,用 RNA 酶 I 消化样本,经蔗糖垫层超速离心、大小筛选、核糖体足迹纯化、文库构建和测序等步骤,分析核糖体在 mRNA 上的结合情况,从而推断翻译效率。

研究结果主要分为以下几个方面:

  1. 技术验证:通过主成分分析(PCA)和皮尔逊相关性计算等方法,对 RNA-Seq 和 Ribo-Seq 数据进行质量控制和重复性评估。结果显示,两种技术的数据重复性良好,Ribo-Seq 数据虽变异性略高,但仍具有可靠性。同时,Ribo-Seq 数据呈现出明显的 3 -nt 周期性,这一特征有助于预测开放阅读框,且 RPF 长度分布在 26 - 34 nt 之间,峰值为 30 nt,与其他研究结果相符。
  2. 基因检测对比:比较了 RNA-Seq、Ribo-Seq 和蛋白质组学数据中检测到的基因数量。发现大量基因在三个数据集中都存在,但也有部分基因仅在 RNA-Seq 或 Ribo-Seq 数据中出现,表明这些基因可能翻译为低丰度或不稳定的蛋白质。
  3. 翻译效率分析:将 Ribo-Seq 产生的核糖体保护片段(RPFs)丰度与 RNA-Seq 估算的 mRNA 丰度进行标准化处理,从而评估转录本的翻译适应性。这一分析为全面了解基因表达调控机制提供了重要依据。

研究结论表明,该研究成功提供了拟南芥根和芽的 Ribo-Seq 生成的 RPFs 综合清单,并通过与 RNA-Seq 数据对比,有效评估了转录本的翻译效率。这一成果填补了植物翻译组研究的部分空白,有助于深入理解植物基因表达在转录和翻译水平的调控机制,为后续研究植物生长发育、环境响应等过程中的基因调控提供了宝贵的数据支持和理论基础。同时,该研究也为其他植物翻译组研究提供了方法学参考,推动了植物生命科学领域的发展。
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