补肾活血颗粒对帕金森病体外模型泛素 - 蛋白酶体系统的影响：开启神经保护新征程

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Effect of Bushen Huoxue Granule on Clearance of Pathological α-Synuclein in MPP+-Induced PC12 Cells

为探究补肾活血颗粒对帕金森病体外模型泛素 - 蛋白酶体系统（UPS）影响，研究人员开展相关研究，发现其可保护 UPS 功能等，意义重大

　　研究旨在探究补肾活血颗粒（Bushen Huoxue Granule）对帕金森病（Parkinson’s disease）体外模型中泛素 - 蛋白酶体系统（ubiquitin - proteasome system，UPS）的影响。用 1 - 甲基 - 4 - 苯基吡啶离子（1 - methyl - 4 - phenylpyridinium，MPP⁺，1 mmol/L）处理细胞 24 小时后，再分别用无药血清、含美多芭（Madopar）血清或含补肾活血颗粒血清（Bushen Huoxue Granule - containing serum，BCS，5%、10% 和 20%）孵育 24 小时。通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测 α - 突触核蛋白（α - synuclein，α - syn）、酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）和 UPS 相关蛋白水平。分别用蛋白酶体抑制剂 MG132 处理和野生型 α - syn 质粒转染 PC12 细胞后，以及后续 BCS 干预引起的变化，也用 Western blot 分析 α - syn 的表达水平。采用免疫细胞化学法检测 α - syn 丝氨酸 129 位点磷酸化（pSer129 - α - syn）表达的变化。用酶联免疫吸附测定法检测 20S 蛋白酶体水平。结果显示，BCS（体积分数≤20%）干预可减轻 MPP⁺诱导的细胞活力下降（P<0.05）。MPP⁺处理的细胞中，α - syn 上调，而 TH 和 UPS 相关蛋白如泛素（ubiquitin，Ub）、与泛素激活酶结合的 Ub（Ub - activating enzyme，UBE1）、帕金蛋白（Parkin）和泛素 C 末端水解酶 - 1（Ub C - terminal hydrolase - 1，UCHL - 1）下调（P<0.05）。BCS 干预可减弱上述变化（P<0.05）。MG132 削弱了 BCS 阻断 α - syn 积累的活性（P<0.05）。质粒转染细胞中 α - syn 水平显著升高，BCS 干预后降低（P<0.05）。MPP⁺诱导的 PC12 细胞中 pSer129 - α - syn 升高，BCS 干预后降低（P<0.05）。MPP⁺诱导的 PC12 细胞 20S 蛋白酶体活性降低，BCS 干预后升高（P<0.05）。结论表明，BCS 干预保护了 UPS 功能，增加了 20S 蛋白酶体活性，促进了病理性 α - syn 的清除，恢复了细胞活力，逆转了 MPP⁺对帕金森病体外模型造成的损伤。