解析 TALEDs 介导 A-to-G 编辑机制，打造高效线粒体基因编辑工具

《Nature Biotechnology》：Leveraging base excision repair for efficient adenine base editing of mitochondrial DNA

为解决 TALEDs 工作机制不明的问题，研究人员开展相关研究，开发出 eTALED6s 等，揭示增强 BER 可提升编辑效率。

　　

转录激活样效应物连接的脱氨酶（TALEDs）利用其单链 DNA（ssDNA）特异性腺苷脱氨酶 TadA₈e 介导线粒体 DNA（mtDNA）的 A 到 G 编辑。这一过程的工作机制尚不清楚，阻碍了更有效的 TALEDs 的开发。在这里，研究揭示 TALED 介导的 A 到 G 编辑依赖于通过碱基切除修复（BER）形成的单链 DNA 区域，这是由双链 DNA 特异性胞苷脱氨酶（DddA）诱导的 C 到 U 脱氨引发的。研究开发了一系列编辑效率更高的增强型 TALEDs（eTALED6s），用高活性变体 DddA6 替代 DddA，并将人类尿嘧啶 DNA 糖基化酶与 TadA₈e 融合。通过进一步改造 TadA₈e，得到的 eTALED6Rs 可诱导高效的靶向编辑，同时降低 DNA 和 RNA 水平的旁观者编辑和脱靶编辑。最后，研究使用 eTALED6 和 eTALED6R 在 mtDNA 中引入致病性突变。揭示 TALED 介导的 A 到 G 编辑机制表明，增强 BER 可提高编辑效率。