基于 IFN-γ/IL-10 比值筛选辅助性 T 淋巴细胞表位，构建抗内脏利什曼病新型多表位疫苗

《Parasites & Vectors》：Screening helper T lymphocyte epitopes based on IFN-γ/IL-10 ratio for developing a novel multi-epitope vaccine candidate using Wolbachia surface protein as an adjuvant against visceral leishmaniasis

为解决内脏利什曼病（VL）疫苗问题，研究人员筛选表位构建多表位疫苗，发现其免疫原性良好，有重要意义。

　　内脏利什曼病（Visceral leishmaniasis，VL）是由利什曼原虫（Leishmania）引起的一种严重寄生虫病，通过白蛉传播 。它的症状包括不规则发热、体重减轻和肝脾肿大等，如果不及时治疗，会危及生命。目前针对 VL 的治疗主要依赖化疗，但化疗药物存在毒性大、成本高和易产生耐药性等问题。虽然此前有通过接种活寄生虫（利什曼化）预防感染的方法，而且多数从 VL 恢复的个体能产生免疫保护，这表明开发抗利什曼病疫苗是可行的，但现有的疫苗研发仍面临诸多挑战。

为了解决这些问题，浙江大学生命科学研究团队开展了一项关于开发新型抗 VL 多表位疫苗的研究。他们通过一系列研究，成功筛选出可能诱导良好免疫反应的辅助性 T 淋巴细胞（Helper T lymphocyte，HTL）表位，并以 Wolbachia 表面蛋白（Wolbachia surface protein，WSP）作为佐剂设计了一种新型多表位疫苗候选物。该研究成果发表在《Parasites & Vectors》杂志上。

在研究方法上，研究人员主要运用了以下关键技术：一是免疫信息学分析，通过多个生物信息学工具对利什曼原虫血红蛋白受体（HbR）、动基体膜蛋白 - 11（KMP - 11）等多种蛋白进行分析，筛选 HTL 和细胞毒性 T 淋巴细胞（Cytotoxic T lymphocyte，CTL）表位，并预测表位的抗原性、毒性、致敏性等；二是分子对接和分子动力学模拟，用于分析疫苗候选物与 Toll 样受体（Toll - like receptor，TLR）2 和 TLR4 的相互作用及稳定性；三是免疫模拟，利用 C - ImmSim 服务器对疫苗候选物进行免疫模拟，预测其免疫原性。

在研究结果部分：

• HTL 和 CTL 表位预测：利用免疫信息学分析，从 HbR、KMP - 11、Gp63、TSA 和 SMT 中鉴定出大量 HTL 和 CTL 表位。例如，HbR 分别鉴定出 305 个 HTL 表位和 628 个 CTL 表位。
• IFN - γ/IL - 10 比值评估及表位验证：对 HTL 表位的 IFN - γ/IL - 10 比值进行评估，筛选出具有高比值且能诱导 Th1 细胞的表位。最终确定 11 个 HTL 表位和 5 个 CTL 表位用于构建多表位疫苗候选物。
• 多表位疫苗候选物构建：将筛选出的 HTL 和 CTL 表位与 WSP 连接构建疫苗候选物，该候选物抗原性指数为 0.666，无致敏性和毒性，与人类和小鼠蛋白不相似。
• 疫苗候选物的评估：对疫苗候选物进行多项评估，发现其群体覆盖率高，理化性质稳定，三维结构质量良好。分子对接和分子动力学模拟表明，疫苗候选物能与 TLR2 和 TLR4 相互作用且结构稳定。免疫模拟显示，疫苗候选物可诱导产生 IgM、IgG 等抗体，Th1 细胞显著增加，细胞因子（IFN - γ、IL - 2、IL - 12 等）分泌增多，且诱导的记忆 Th 细胞数量多于对照 Leish - 111f。

在研究结论和讨论部分，研究人员指出，通过免疫信息学结合 IFN - γ/IL - 10 比值筛选表位的策略，成功设计出一种新型多表位疫苗候选物。该疫苗候选物可能与 TLR2 和 TLR4 相互作用，展现出良好的免疫原性，有利于清除利什曼原虫。不过，该研究也存在一定局限性，如基于生物信息学的疫苗设计预测准确性有限，疫苗候选物实际疗效需体内实验验证，WSP 作为佐剂的效果也需与其他标准佐剂对比评估。尽管如此，这项研究为利什曼病及其他传染病疫苗的开发提供了重要参考，开拓了新的研究思路和方法，推动了传染病疫苗研发领域的发展 。