精准定位 msk基因候选区域，加速辣椒杂交育种进程

《Horticulture, Environment, and Biotechnology》：Development of a molecular marker based on the candidate gene CaMYB80 for genic male sterility msk in pepper (Capsicum annuum L.)

为定位 msk基因，研究人员开发 HRM 标记构建精细图谱，确定候选基因，助力辣椒育种。

　　辣椒（Capsicum annuum L.）杂交品种常利用细胞质雄性不育（CGMS）或基因雄性不育（GMS）系统进行经济高效的种子生产。目前已报道超 20 个辣椒 GMS 基因，自然发生的 ms_k在韩国辣椒育种中应用广泛。本研究旨在通过开发高分辨率熔解（HRM）标记构建 ms_k基因座附近的精细图谱，并鉴定 ms_k基因的候选基因。研究利用 806 株 F₂植株进行标记开发和精细图谱构建，从雄性可育（Ms_kMs_k）和雄性不育（ms_kms_k）植株的下一代重测序中识别单核苷酸多态性（SNP），开发出 14 个 HRM 标记并构建精细图谱。将遗传连锁图谱与辣椒 10 号参考染色体的物理图谱对比，发现图谱标记顺序同线性。5 个 HRM 标记 HRM1524718、HRM1530835、HRM1531314、HRM1534857 和 HRM1535009 与雄性育性表型共分离，将目标区域限定在 10 号染色体上 142 kb（693 - 835 kb）范围内，在此区域鉴定出 12 个候选基因。其中强候选基因 T459_24638（CaMYB80）编码转录因子 MYB80，已有研究表明该因子在拟南芥（Arabidopsis thaliana）花粉发育和绒毡层程序性细胞死亡调控中发挥关键作用。对比雄性可育（Ms_kMs_k）和雄性不育（ms_kms_k）植株的 T459_24638 基因序列，发现 ms_k等位基因的第三外显子存在 163 bp 插入，导致提前终止密码子出现，这意味着该基因的破坏可能引发雄性不育。基于此插入，开发出 msk - HRM 标记用于区分 Ms_k和 ms_k等位基因。这些研究结果表明，基于基因的标记有望加速利用 GMS 的辣椒杂交育种进程，同时对候选基因的鉴定也有助于深入理解辣椒花粉发育的分子机制。