泰国南部硬蜱中类柯克斯体共生菌的分子流行情况及伯纳特柯克斯体首次记录：探索蜱传疾病新线索

《Scientific Reports》：Molecular prevalence of Coxiella like endosymbionts and the first record of Coxiella burnetii in hard ticks from Southern Thailand

为探究泰国南部硬蜱中柯克斯体细菌（Coxiella）的存在情况，研究人员开展相关研究，发现多种硬蜱携带 Coxiella，且首次记录到 H. hystricis 和 D. steini 中存在 C. burnetii，为蜱传疾病防控提供依据。

　　在神秘的大自然中，蜱虫虽小，却隐藏着巨大的健康威胁。蜱虫是多种疾病的传播媒介，在东南亚地区，温暖湿润的气候滋养了丰富的蜱虫种类，超过 90 种硬蜱在这里 “安营扎寨”，泰国就有 58 种之多。蜱虫携带的病原体五花八门，像巴贝斯虫病、埃立克体病、肝簇虫病、莱姆病、立克次体病以及 Q 热等，严重危害着人类和动物的健康。

柯克斯体（Coxiella）属细菌在其中扮演着重要角色，它分为致病性的伯纳特柯克斯体（C_. burnetii）和非致病性的类柯克斯体共生菌（CLEs）。C_. burnetii 能引发人类的 Q 热和动物的柯克斯体病，而 CLEs 对蜱虫生存至关重要，可为其提供营养并助力繁殖。在泰国，虽然此前已有 C_. burnetii 感染动物和人类的报道，也有研究检测过相关抗体的血清阳性率，但对于蜱虫中 C_. burnetii 和 CLEs 的流行情况，尤其是在生物多样性丰富的南部地区，了解甚少。为填补这一空白，来自泰国玛希隆大学（Mahidol University）的研究人员踏上了探索之旅，他们的研究成果发表在《Scientific Reports》上，为蜱传疾病的防控带来了新的曙光。

研究人员为深入了解泰国南部硬蜱中 Coxiella 细菌的分布情况，运用了多种关键技术方法。在样本采集方面，从 2021 年 7 月至 2022 年 5 月，每两个月用镊子在泰国南部宋卡府合艾区植被上采集成年蜱虫样本。在蜱虫鉴定上，先依据形态特征初步识别，再通过 PCR 扩增线粒体 16S rRNA、细胞色素 c 氧化酶 I（COI）和内转录间隔区 2（ITS2）基因并测序，精准确定蜱虫种类。对于 Coxiella 细菌的检测，以 16S rRNA、groEL 和 rpoB 基因为靶点进行 PCR 扩增，经电泳、切胶纯化后测序。同时，利用 MEGA X 软件进行系统发育树分析，DnaSP v5 软件和 PopART 软件分别进行单倍型分析和构建单倍型网络。

研究结果如下：

• 蜱虫种类鉴定：共采集到 466 只成年蜱虫，分属 3 个属 8 个种，革蜱属（Dermacentor）占主导。通过分子鉴定和 BLASTn 分析，确认了各蜱虫种类与 GenBank 中序列的高度相似性，像 A_. testudinarium 与泰国相关序列相似度达 99.77%，D_. compactus 与马来西亚的部分序列完全相同。
• Coxiella 细菌的分子检测：在 466 只蜱虫样本中，93 只检测到 Coxiella 细菌，且所有蜱虫种类均呈阳性。其中，D_. compactus、D_. steini 等蜱虫分别有不同数量的样本检测出 Coxiella 细菌，所有检测出 C_. burnetii 的样本均采集于 2022 年 1 月。
• DNA 序列和系统发育分析：基于 16S rRNA 基因部分序列构建的系统发育树清晰显示，Coxiella 细菌分为 C_. burnetii 和 CLEs 两组。C_. burnetii 的序列与其他地区蜱虫、山羊和人类中检测到的高度相似；CLEs 则聚类在不同分支，与其他地区不同蜱属中的 CLEs 存在关联。
• C_. burnetii 和 CLEs 的序列比对：详细比对 16S rRNA 序列发现，C_. burnetii 和 CLEs 在 DNA 序列上有 3 个显著差异位点，分别位于 235、349 和 350 位碱基，这可作为区分两者的可靠分子标记。
• 单倍型分析：构建的单倍型网络表明，Coxiella 的单倍型分为 C_. burnetii 和 CLEs 两大主要组，共 23 个单倍型。C_. burnetii 分布在 4 个单倍型中，CLEs 分布在 19 个单倍型中，且不同蜱虫种类的 CLEs 单倍型存在差异，部分为泰国特有。

在讨论部分，研究人员指出，此次在宋卡府相对较小区域的植被上发现 8 种蜱虫，反映了该地区蜱虫种类的多样性。研究首次报道了泰国 H_. semermis 和 D_. compactus 中存在 CLEs，同时 16S rRNA 基因测序能准确区分 C_. burnetii 和 CLEs，为后续研究提供了重要的分子工具。此外，此次研究首次记录了泰国南部植被中 D_. steini 和 H_. hystricis 携带 C_. burnetii，这意味着 C_. burnetii 在东南亚的分布范围可能比之前认知的更广。不过，D_. steini 和 H_. hystricis 中 C_. burnetii 的潜在致病性尚不明确，蜱虫在传播该病原菌中的具体作用以及不同地区 C_. burnetii 的致病性都有待进一步研究。持续监测蜱传疾病对于保障泰国及周边国家人类和动物的健康至关重要，此次研究为后续深入探究蜱传疾病传播机制和防控策略奠定了坚实基础。