探索原发性开角型青光眼诊断新靶点：m6A 调节因子的关键作用

《BMC Medical Genomics》：Exploring diagnostic m6A regulators in primary open-angle glaucoma: insight from gene signature and possible mechanisms by which key genes function

为探究原发性开角型青光眼（POAG）小梁网（TM）组织损伤机制，研究人员开展 m6A 调节因子研究，发现其可作诊断标志物，YTHDC2 参与细胞功能调节，为 POAG 研究提供新方向。

　　青光眼是全球范围内导致永久性视力损害的主要原因之一，原发性开角型青光眼（POAG）作为其最常见的类型，约占所有青光眼患者的 74%。目前，POAG 的发病机制复杂且尚未完全明确，临床上也缺乏根治方法。升高的眼压是唯一可治疗的风险因素，而小梁网（TM）在维持眼压平衡中起着关键作用，TM 功能障碍会导致房水引流减少，进而引发 POAG。然而，现有的青光眼治疗药物并未针对 TM 功能进行修复，因此，深入探索 POAG 中 TM 功能障碍的机制，对开发靶向药物至关重要。

越来越多的研究开始关注表观遗传调控在 POAG 中的作用，其中 N⁶- 甲基腺苷（m⁶A）RNA 修饰作为一种重要的表观遗传修饰方式，参与多种生物过程的调控，但在青光眼领域的研究较少。在此背景下，来自湖南工程研究中心（青光眼人工智能诊断与新材料应用）、中南大学爱尔眼科学院等机构的研究人员开展了相关研究，旨在探索 m⁶A 调节因子在 POAG 患者 TM 组织损伤过程中的潜在作用，该研究成果发表在《BMC Medical Genomics》上。

研究人员主要运用了生物信息分析、细胞实验等关键技术方法。生物信息分析方面，从 Gene Expression Omnibus（GEO）数据库检索 POAG 相关数据集，经筛选和预处理后进行分析。细胞实验则包括培养原代人小梁网细胞（HTMCs），进行细胞转染、RNA 提取及定量逆转录聚合酶链反应、免疫荧光染色和细胞迁移实验等。

研究结果如下：

1. m⁶A 调节因子的表达分析：通过对 GSE27276 数据库分析，研究人员筛选出 5 个在 POAG 患者 TM 组织和正常组织中表达存在差异的 m⁶A 调节因子，分别是 RBM15、YTHDC2、YTHDF1、RBMX 和 ALKBH5。相关性分析显示，不同 m⁶A 调节因子之间存在不同程度的相关性。
2. 疾病特征基因筛选与模型构建：利用随机森林（RF）模型和支持向量机（SVM）模型筛选 POAG 特征基因，RF 模型表现更优。基于筛选出的 5 个重要基因（YTHDF1、RBMX、ALKBH5、YTHDC2 和 RBM15）构建列线图，经评估该模型具有较高准确性，可用于预测 POAG 风险。
3. 样本聚类分析：根据 5 个核心 m⁶A 调节因子的 mRNA 表达对 POAG 样本进行聚类分析，可将样本分为两个亚型。两个亚型在免疫细胞浸润方面存在差异，激活的 CD8⁺T 细胞和调节性 T 细胞在 m⁶Acluster 亚型 B 中含量更高。进一步分析发现，两种聚类方式结果一致，但聚类结果与患者种族、性别和诊断年龄无关。
4. 细胞功能相关研究：构建 HTMC 氧化应激细胞模型和 TGF-β2 刺激细胞模型，发现 YTHDC2 mRNA 在两种模型中均显著下调。沉默 YTHDC2 可增强 HTMCs 的迁移能力，促进细胞外基质（ECM）合成；过表达野生型 YTHDC2 则产生相反效果，而过表达缺失 YTH 结构域的 YTHDC2 对 ECM 合成无显著影响，表明 YTHDC2 可能通过其 YTH 结构域调节 ECM 合成。

研究结论和讨论部分指出，POAG 患者 TM 组织中差异表达的 m⁶A 调节因子有望成为潜在的诊断生物标志物。YTHDC2 在氧化应激或 TGF-β2 干预下，通过 m⁶A 修饰调节 HTMCs 的迁移和 ECM 合成能力，这可能是 POAG 疾病进程的重要组成部分。然而，研究也存在一定局限性，如样本量不足、GEO 数据集临床信息缺乏等。尽管如此，该研究为 POAG 的发病机制研究提供了新的视角，为后续开发更有效的治疗方法奠定了基础，未来可进一步深入研究 m⁶A 调节因子在 POAG 中的具体调控机制，探索其作为治疗靶点的可行性 。