荧光 / 比色双检测法灵敏测定酸性磷酸酶（ACP）：血清分析新利器

《Journal of Fluorescence》：A Colorimetric/Fluorescence Dual Detection for Acid Phosphatase Based on Copper Nanoclusters

为检测酸性磷酸酶（ACP），研究人员建立了荧光 / 比色双检测法，灵敏度高且适用于血清样本分析。

　　一种简单有效的酸性磷酸酶（ACP）荧光 / 比色双检测方法建立。合成了具有蓝色发射的光致发光铜纳米簇（CuNCs），这些纳米簇还具有类似过氧化物酶的活性，能够加速 3,3',5,5'- 四甲基联苯胺（TMB）转化为有色氧化形式（oxTMB）。作为铜的强配体，焦磷酸（PPi）会抑制这种催化作用。当存在酸性磷酸酶（ACP）时，它会将焦磷酸（PPi）水解为无结合作用的磷酸根，从而恢复被抑制的催化反应。这使得 oxTMB 的吸光度增加，产生比色信号。同时，由于铜纳米簇（CuNCs）的发射光谱与 oxTMB 的吸收光谱有良好的重叠，荧光信号会通过内滤效应（IFE）减弱。吸光度的增加和荧光的减弱都可用于定量酸性磷酸酶（ACP）的活性。比色信号在 0.1 - 10 U/L 范围内对酸性磷酸酶（ACP）呈线性响应，检测限为 0.01 U/L；荧光检测在 0.005 - 10 U/L 范围内响应，检测限为 0.001 U/L。由于采用相同的试剂和步骤，该方法可根据所需性能和可用仪器轻松在两种检测模式间切换。通过对人血清样本的分析，验证了该检测方法的适用性。