基于自噬相关免疫靶点构建胰腺癌预后模型，为免疫治疗开辟新路径

《Discover Oncology》：Identification of autophagy-related immune targets for enhancing immunotherapy in pancreatic cancer aggressiveness

胰腺癌（PC）预后差，转移影响患者结局。研究人员开展了鉴定自噬相关基因（ARGs）作为免疫靶点的研究。结果发现 5 个 ARGs 可构建预后模型，RHEB 与 LC3 呈负相关。这为 PC 免疫治疗提供新靶点，推进精准治疗。

　　胰腺癌，这个隐匿在人体深处的 “杀手”，一直以来都是全球医学领域难以攻克的难题。根据 GLOBOCAN 2020 的统计数据，它在全球恶性肿瘤发病率中排第 12 位，却在死亡率排行榜上高居第 7 位 。患者的中位生存时间极短，5 年生存率仅约 9% 。造成这种困境的主要原因包括早期诊断困难、癌细胞侵袭性强以及对化疗药物的抵抗。

随着癌症免疫治疗的兴起，人们看到了攻克癌症的新希望。免疫治疗旨在激活人体自身免疫系统，识别并清除癌细胞。然而，要实现精准有效的免疫治疗，关键在于找到癌细胞独特的分子特征，以此设计出精准的免疫靶点。自噬，作为细胞内一种重要的自我保护机制，参与细胞内物质的降解和循环利用，维持细胞内环境的稳定。近年来的研究发现，自噬在多种癌症中存在异常调节，尤其是在胰腺癌中，自噬失调与癌细胞的侵袭和转移密切相关。自噬相关基因（ARGs）在这一过程中发挥着关键作用，但目前其具体机制尚不明确，针对胰腺癌中 ARGs 的研究也相对较少。因此，探索 ARGs 在胰腺癌转移中的作用机制，寻找潜在的免疫治疗靶点，构建更精准的预后模型，成为了当下亟待解决的问题。

重庆医科大学附属第一医院等研究机构的研究人员开展了一项旨在识别和验证可作为免疫靶点的 ARGs 的研究。研究人员通过筛选差异表达的 ARGs，结合 Cox 回归和 LASSO 分析，构建并验证了包含 5 个 ARGs（CASP1、RHEB、CHMP2B、MYC 和 HDAC6）的预后模型。同时，利用功能分析、免疫浸润评估和实验验证等方法，深入探究了 ARGs 的作用机制。该研究成果发表在《Discover Oncology》杂志上。

为开展此项研究，研究人员运用了多种关键技术方法。首先，从 GEO 数据库的 GSE19279 数据集和 HADb 数据库收集数据，筛选差异表达的 ARGs。接着，通过构建 5 - ARGs 预后模型，进行生存分析、风险评分计算等评估模型效能。利用 GO 和 KEGG 富集分析预测基因功能，构建 TF/miRNA/mRNA 网络探究基因调控关系。还通过细胞培养获取细胞样本，运用 RNA 提取、qPCR、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）、蛋白质免疫印迹（WB）等实验技术对相关基因进行检测和验证。

下面介绍具体的研究结果：

1. 筛选和模型构建：从 GSE19279 数据集筛选出 1113 个差异表达的 mRNA（DEmRNAs），与 HADb 数据库中的 243 个人类 ARGs 交叉分析，得到 22 个差异表达的 ARGs（DEARGs）。经 Kaplan - Meier（KM）法和 Cox 回归分析，再通过 LASSO Cox 回归最终确定 5 个与总生存期（OS）密切相关的 ARGs，并构建了预后模型。
2. 模型应用与评估：风险评分分布、生存分析和热图结果显示，高风险评分与较高死亡率相关，低风险组患者的 OS 明显更长。1 - 3 - 5 年 OS 的风险评分曲线下面积（AUC）分别为 0.68、0.69 和 0.70 ，表明该模型具有良好的预后预测能力。在不同性别、分期和 T 分期的亚组分析中，低风险组均显示出更好的预后。
3. 功能分析与药物筛选：GO 和 KEGG 分析表明，ARGs 主要富集在自噬相关的生物学过程中，提示其通过调节自噬影响肿瘤进展。通过 L1000FWD 和 PubChem 筛选出 Apicidin、Simvastatin 等有潜力的小分子药物，这些药物可能通过诱导自噬下调 ARGs 表达，为胰腺癌的靶向治疗提供了新方向。
4. 调控网络与相关性分析：构建的 TF/miRNA/mRNA 网络显示，多数核心基因受 FOS 和 MYC 调控。Pearson 相关性分析发现，RHEB、CHMP2B 等多个 ARGs 与自噬关键成分 MAP1LC3B 存在显著关联，暗示它们可能通过自噬调节胰腺癌转移。
5. 免疫浸润分析：免疫浸润分析表明，转移患者的基质、免疫和 ESTIMATE 评分较低，肿瘤纯度较高。CIBERSORT 分析发现，原发性和转移性病例中 22 种免疫细胞亚群存在差异，T 细胞滤泡辅助细胞和 CD8 T 细胞在原发性病例中占优势，而 CD8 T 细胞和调节性 T 细胞（Tregs）在转移性病例中更为突出。同时，多个 ARGs 与不同免疫细胞亚群存在相关性，表明这些 ARGs 在调节免疫细胞浸润中发挥作用。
6. 基因表达特征与功能验证：利用 TCGA + GTEx - PAAD 数据和 qPCR 检测发现，除 HDAC6 外，其余 4 个 ARGs 在胰腺癌组织和细胞系中的表达显著升高。对 RHEB 进行功能验证发现，沉默 RHEB 可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并且 RHEB 沉默后，自噬标记物 LC3 表达上调，二者呈负相关，表明 RHEB 可能通过调节自噬影响胰腺癌进展。

研究结论与讨论部分指出，本研究成功识别并验证了 5 个与胰腺癌转移和预后密切相关的 ARGs，构建的预后模型能更精准地预测患者生存情况，优于传统临床病理数据。这些 ARGs 通过调节自噬和免疫浸润影响胰腺癌转移，研究还提出了针对这些 ARGs 的小分子药物。不过，研究也存在局限性，如样本量有限且临床数据主要来自高加索人群，免疫细胞浸润评估方法单一等。尽管如此，该研究仍为胰腺癌免疫治疗提供了新的潜在靶点和治疗思路，有助于推动精准医学在癌症治疗中的发展，为未来进一步探索胰腺癌的发病机制和治疗策略奠定了重要基础。