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分析前的变量(如血浆或细胞外囊泡储存条件)会影响miRNA的稳定性
ExRNA:Influence of pre-analytical conditions on cell-free microRNA stability in blood plasma samples
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年03月26日 来源:AAAS
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在今天发表在《ExRNA journal》上的一项研究中,来自新西伯利亚化学生物学和基础医学研究所的研究人员已经证明,分析前变量,如血浆或细胞外囊泡储存条件,会影响mirna的稳定性,从而影响单个microrna的检测浓度。
在今天发表于ExRNA 来自新西伯利亚化学生物学和基础医学研究所的研究人员已经证明,分析前的变量,如血浆或细胞外囊泡储存条件,会影响mirna的稳定性,从而影响单个microrna的检测浓度。
世界各地的许多科学家正试图利用各种体液(血液、尿液、唾液等)提高疾病诊断或预后的质量,包括肿瘤疾病。MicroRNA分子(大小为18至25个核苷酸)是众所周知的基因表达和细胞内通讯分子的转录后调节剂。人体生物体液含有大约3000个单独的microRNA,从正常细胞或肿瘤细胞中释放出来。MicroRNA以不同的生物聚合物复合物形式在生物体液中循环,并被包裹在微泡中,相当稳定,因此被认为是肿瘤或其他病理状态液体活检的方便诊断材料来源。
为了作为生物标志物使用,必须制定基于知识的普遍接受的生物样品处理系统指南,包括microRNA的储存稳定性。
“在我们的实验室里,我们正在研究各种肿瘤疾病发展过程中血液和尿液中的无细胞微rna。”这项研究的主要贡献者之一Ivan Zaporozhchenko博士说:“在我们的研究开始时,我们不仅面临着选择诊断/预后小核糖核酸的最佳来源(简单地与血液/尿液蛋白质结合或作为这些生物液体的细胞外囊泡的一部分),而且还面临着储存含有小核糖核酸样品的方法和条件的选择。”
Ivan Zaporozhchenko说:“应该详细探索产生可重复结果的分析前条件,并对其进行适当验证,以便建立用于分析microRNA表达的生物液体取样和处理的金标准方案。”
本研究旨在评估血浆储存条件对人血浆内源性mirna稳定性的影响。我们报道了四种内源性miRNA (-16, -19b, -23a, -451a)和cell - mir -39作为外源性miRNA在不同温度下的短期和长期孵育的稳定性,以及长期储存对EVs(细胞外囊泡)miRNA稳定性的影响。此外,我们还比较了新鲜和存档血浆样品的miRNA产量,以及miRNA提取方案和RNA保护剂的变化对分离效率的影响。重要的免责声明是,在本研究中,我们使用了单相miRNA分离方法,我们已经成功地在几项旨在寻找血液中肺癌miRNA生物标志物的研究中使用了该方法。
在我们的研究中,我们证实了mirna的降解率会受到它们的结构和包装的影响。在生物体液中加入不同的稳定溶液会影响miRNA的提取效率。
总的来说,我们的长期研究结果表明,需要在收到生物样品后2-4周内分析无细胞核酸,包括microRNA。
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