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为解决虫草 β- 葡聚糖检测难题，研究人员开发刚果红紫外分光光度法，发现不同虫草 β- 葡聚糖含量差异，助力相关产业。
# 虫草 β- 葡聚糖定量检测新突破：开启真菌多糖研究与应用新篇章
在神奇的生物世界里，真菌一直扮演着独特而重要的角色。虫草，这种寄生在昆虫、少数真菌和植物体上的特殊真菌，自古以来就备受关注。它不仅是传统的名贵中药材，在现代研究中，其蕴含的多种生物活性成分更是展现出巨大的药用潜力。其中，β- 葡聚糖（β -Glucan）作为虫草的关键成分之一，具有免疫调节、抗肿瘤等多种重要功能，在食品和制药领域有着广泛的应用前景。
然而，长期以来，虫草 β- 葡聚糖的检测一直缺乏标准化方法。这一现状严重阻碍了虫草相关产品的质量控制和资源优化利用，也限制了对虫草生物活性成分的深入研究。为了解决这一关键问题，云南大学的研究人员开展了一项极具意义的研究。他们旨在开发一种高效、准确且成本效益高的 β- 葡聚糖检测方法，为虫草产业的发展提供有力支持。
研究成果发表在《Scientific Reports》上，为该领域带来了新的突破。研究人员开发了一种刚果红紫外分光光度法（Congo Red Ultraviolet Spectrophotometry）用于定量检测虫草中的 β- 葡聚糖。
研究人员在研究过程中用到了多个关键技术方法。首先是样本处理技术，他们从云南不同地区采集野生虫草样本，通过组织分离获得纯菌株，经过灭菌、培养、发酵等一系列处理后得到用于检测的样本。其次是优化实验条件技术，系统研究了不同提取试剂、pH 值、温度和时间对 β- 葡聚糖提取效率的影响，确定最佳提取条件。最后是检测分析技术，利用刚果红与 β- 葡聚糖特异性结合产生吸收光谱红移的特性，采用紫外分光光度计进行检测，并通过标准曲线计算 β- 葡聚糖含量，同时对方法进行精密度、重复性、稳定性和回收率等验证。
在实验中，研究人员对提取参数进行了优化。通过比较五种不同的提取试剂（氢氧化钾、氢氧化钠、盐酸、二甲基亚砜（DMSO）和蒸馏水）对 β- 葡聚糖提取效率的影响，发现 DMSO 的提取效果最佳。进一步研究发现，反应体系的最佳 pH 值为 7.0，此时 β- 葡聚糖与刚果红的结合效果最好，检测灵敏度最高；最佳提取温度为 65°C，温度过高会导致 β- 葡聚糖结构破坏，提取效率下降；最佳提取时间为 60min，过长的提取时间会使 β- 葡聚糖水解，影响检测结果。
研究人员还对建立的刚果红紫外分光光度法进行了全面的方法验证。精密度实验结果显示，该方法的相对标准偏差（RSD）为 0.336%，表明仪器和方法的精密度高；重复性实验中，RSD 为 1.272%，说明实验方法在样本处理和测量过程中具有良好的重复性；稳定性实验中，标准溶液和样品溶液在不同时间点测量的 RSD 分别为 0.638% 和 0.687%，证明该方法稳定性良好；回收率实验中，平均回收率达到 100.93%，RSD 为 1.391%，满足检测要求，说明该方法准确性高。
最后，研究人员运用该方法对三种不同的虫草（蛹虫草（C. militaris）、蝉花虫草（C. cicadae）和球孢白僵虫草（C. fumosorosea））进行了 β- 葡聚糖含量测定。结果发现，三种虫草的 β- 葡聚糖含量虽有差异但并不显著，其中球孢白僵虫草的 β- 葡聚糖含量略高于其他两种虫草。同时，研究还表明，虫草样本中的 β- 葡聚糖是由真菌自身代谢产生，而非来自培养基。
研究结论和讨论部分指出，该研究开发的刚果红紫外分光光度法为虫草 β- 葡聚糖的定量检测提供了一种可靠的方法。与现有技术相比，该方法具有诸多优势，如试剂成本低、操作简单、检测快速、准确性高、抗干扰能力强等，适用于工业规模的 β- 葡聚糖分析，尤其在高通量筛选场景中具有很大的应用潜力。此外，研究发现球孢白僵虫草的 β- 葡聚糖含量与蛹虫草相当，表明其在食品和医药领域可能具有相似的应用潜力，但还需进一步分析其其他生物活性成分的含量。然而，该研究也存在一定的局限性，实验仅针对三种虫草进行，方法对其他虫草物种的适用性还需进一步验证，同时还需要与其他检测技术进行交叉验证以确认其绝对优势。
这项研究为虫草 β- 葡聚糖的检测和应用提供了重要的技术支持，为虫草产业的发展奠定了坚实的基础，也为后续深入研究真菌多糖的结构与功能关系开辟了新的道路，在生命科学和健康医学领域具有重要的意义。
