首次发现：健康母马阴道微生物群中存在绵羊乳头瘤病毒 DNA

《Scientific Reports》：Digital droplet PCR-based detection and quantification of ovine papillomavirus DNA from the vaginal virobiota of healthy mares

为探究无症状母马阴道微生物群是否携带绵羊乳头瘤病毒（OaPVs），研究人员用 ddPCR 检测，发现 OaPV1 最普遍，ddPCR 更敏感。

　　在动物的世界里，母马的健康一直是人们关注的重点，尤其是它们的生殖健康。母马的阴道微生物群是一个神秘的 “小世界”，其中的病毒成分更是知之甚少。乳头瘤病毒（PVs）作为一类能感染多种动物皮肤和黏膜的病毒，在不同动物体内有着不同的影响。绵羊乳头瘤病毒（OaPVs）分为四种基因型，与绵羊的良性和恶性肿瘤有关，还能发生跨物种传播。然而，对于健康母马阴道微生物群中是否存在 OaPVs，此前尚无定论。为了揭开这个谜团，来自意大利多个研究机构的研究人员开展了相关研究，该研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员主要运用了数字滴液聚合酶链反应（ddPCR）和实时定量聚合酶链反应（qPCR）这两种关键技术。样本来自意大利多个地区、不同品种的 90 匹 3 - 21 岁母马，这些母马因非生殖系统疾病被送往都灵兽医教学医院，研究人员在获得其主人同意后，用无菌细胞刷采集了它们的阴道样本。

研究结果如下：

1. OaPVs 的检测频率：使用 ddPCR 检测时，约 26.6%（25/94）的阴道拭子样本中检测到 OaPV DNA；而使用 qPCR 检测时，只有约 11.7%（11/94）。McNemar 检验表明，这两种检测方法的差异具有统计学意义（p<0.0005）。
2. OaPVs 的基因型分布：在检测到 OaPV 感染的阴道拭子中，通过 ddPCR 发现 92%（23/25）为 OaPV1 阳性，qPCR 检测出的 OaPV1 阳性样本仅占 44%（11/25）；两种检测方法都显示，8%（2/25）的样本为 OaPV3 阳性。Fisher 精确检验显示，ddPCR 和 qPCR 检测 OaPV1 基因阳性样本数差异显著（p<0.0001）。
3. 病毒载量：OaPV1 DNA 的拷贝数 /μL 范围为 0.1 - 0.5，qPCR 检测的 OaPV1 DNA 的循环阈值（CT）值在 33.3 - 35.0 之间，与 ddPCR 数据相关。OaPV3 DNA 的拷贝数 /μL 分别为 0.7 和 1.0，CT 值分别为 30.8 和 32.6 。

研究结论与讨论：
此次研究首次证实健康母马阴道拭子中存在 OaPV DNA，其中 OaPV1 是最普遍的基因型。与其他样本中检测到的 OaPV DNA 拷贝数相比，本次研究中检测到的拷贝数较低。ddPCR 在检测低病毒丰度的 OaPVs 方面表现出更高的准确性和敏感性，可作为检测可能影响母马繁殖效率的潜在病原体的可靠方法。

虽然目前尚不清楚 OaPVs 存在于母马阴道微生物群中的生物学意义，但已有研究表明，PVs 与女性亚生育能力存在关联，OaPVs 也可能导致母牛垂直感染和妊娠丢失。因此，OaPVs 可能是影响母马繁殖效率的潜在风险因素。

此外，OaPVs 能在马属动物中表达，引发新的跨物种传播，且与马肉瘤相关。未来需要进一步研究母马生殖道 OaPV 感染，明确其与马繁殖效率之间的因果关系，这需要进行剂量 - 反应分析，因为病毒载量是致病性的关键指标之一。

总的来说，该研究不仅为马的生殖健康研究提供了新的视角，也为进一步探究 OaPVs 的传播机制和致病机理奠定了基础，对动物健康和繁殖领域的发展具有重要意义。