H105A 肽滴眼液：视网膜退行性疾病的新希望

《Communications Medicine》：H105A peptide eye drops promote photoreceptor survival in murine and human models of retinal degeneration

研究人员针对视网膜色素变性（RP）开展 PEDF 衍生肽研究，发现 H105A 肽滴眼液可促进光感受器存活，具有治疗潜力。

　　视网膜退行性疾病，如视网膜色素变性（Retinitis Pigmentosa，RP）和年龄相关性黄斑变性（Age - related Macular Degeneration，AMD），正逐渐成为导致失明的重要原因。其中，RP 作为最常见的遗传性视网膜疾病，以光感受器细胞进行性丧失为特征，全球约每 4000 人中就有 1 人患病。然而，由于 RP 的遗传异质性，开发有效的治疗方法极具挑战。目前，大多数针对光感受器的眼部给药途径，如玻璃体内注射、视网膜下注射等，都具有不同程度的侵入性，这不仅增加了患者的痛苦，还可能带来一系列并发症。因此，寻找一种安全、有效的治疗 RP 的方法迫在眉睫。

为了解决这一难题，来自美国国立卫生研究院（National Institutes of Health）、意大利摩德纳和雷焦艾米利亚大学（University of Modena and Reggio Emilia）等机构的研究人员展开了深入研究。他们聚焦于色素上皮衍生因子（Pigment Epithelium - Derived Factor，PEDF），旨在探索其衍生肽对视网膜退行性疾病的治疗潜力。研究成果发表在《Communications Medicine》上。

研究人员采用了多种关键技术方法。在动物实验方面，选用了 rd10 小鼠（Pde6b 基因突变，模拟常染色体隐性 RP）、rd10/Serpinf1^-/-小鼠（PDE6b 突变且 Serpinf1 基因缺失，增加视网膜变性易感性）以及 Rho^P23H/+小鼠（携带 P23H 突变，模拟常染色体显性 RP），并使用了 C57BL/6 J 小鼠作为对照。在细胞实验方面，利用人类诱导多能干细胞（human - induced pluripotent stem cell，hiPSC）分化得到视网膜类器官（Retinal Organoids，ROs）。同时，通过荧光标记、免疫荧光染色、蛋白质印迹、酶活性检测、电生理检测等技术，对肽的穿透性、生物利用度、对光感受器细胞的保护作用以及视网膜功能进行评估。

研究结果如下：

1. PEDF 衍生肽的视网膜穿透性：研究发现，17 - mer 和 H105A 肽经滴眼液给药后，能够成功穿透小鼠视网膜，且在光感受器层具有较高的亲和力和生物利用度。而 R99A 肽由于缺乏对 PEDF 受体（PEDF - R）的亲和力，在视网膜中的穿透和定位效果较差。
2. 对 rd10 小鼠模型的作用：在 rd10 和 rd10/Serpinf1^-/-小鼠模型中，17 - mer 和 H105A 肽滴眼液可有效减少光感受器细胞死亡，降低磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）外化水平，调节促凋亡蛋白 BAX 和抗凋亡蛋白 BCL2 的表达，使 BAX/BCL2 比值降低。同时，改善光感受器的形态，增加外核层（Outer Nuclear Layer，ONL）厚度和光感受器外段（Outer Segment，OS）长度，提高视网膜电生理功能，增强对光刺激的反应。
3. 对 Rho^P23H/+小鼠模型的作用：H105A 肽滴眼液在 Rho^P23H/+小鼠模型中同样表现出良好的效果。从 P14 开始给药，可促进光感受器存活，抑制凋亡途径，增加 ONL 厚度，尤其是在视网膜腹侧区域，该区域在疾病进展中通常更容易受到影响。此外，通过腺相关病毒（Adeno - Associated Virus，AAV）载体将 H105A 基因导入 Rho^P23H/+小鼠眼内，实现了 H105A 肽的长期表达。结果显示，AAV - H105A 治疗可减少炎症反应，降低 BAX 水平，增加 BCL2 水平，减少 TUNEL 阳性光感受器细胞核数量，改善视网膜形态和功能，在注射后 6 个月仍能观察到明显的治疗效果。
4. 对人类视网膜类器官的作用：在 hiPSC 衍生的人类视网膜类器官实验中，研究人员用香烟烟雾提取物（Cigarette Smoke Extract，CSE）诱导光感受器细胞死亡，模拟氧化应激环境。结果表明，H105A 肽能够显著减少 CSE 诱导的细胞死亡，降低 PS 外化水平，减少 Ethidium homodimer 染色阳性细胞数量，降低 TUNEL 阳性细胞核数量，促进人类视网膜光感受器的存活。

研究结论和讨论部分指出，17 - mer 和 H105A 肽作为神经营养剂，在多种视网膜变性模型中展现出保护光感受器活力、形态和功能的潜力。这些肽通过局部给药，能够有效靶向 PEDF - R，干扰与视网膜疾病相关的细胞死亡途径。研究结果为视网膜退行性疾病的治疗提供了新的思路和方法，尤其是 H105A 肽，具有广泛的应用前景，可能对包括 RP、AMD、脉络膜血症、Usher 综合征、Stargardt 病、糖尿病视网膜病变等在内的多种视网膜疾病发挥治疗作用。

此外，本研究还具有重要的创新性。一方面，滴眼液给药方式为视网膜疾病的治疗提供了一种安全、简便的选择，有望提高患者的依从性；另一方面，基因治疗方法通过玻璃体内注射 AAV 载体，避免了视网膜脱离的风险，实现了更广泛的视网膜覆盖。然而，研究也存在一些局限性，如动物模型中眼部穿透性在人类中的转化程度、治疗效果的持久性等问题，仍需进一步研究。总体而言，这项研究为视网膜退行性疾病的治疗开辟了新的方向，为未来的临床应用奠定了坚实的基础。