《Pflügers Archiv - European Journal of Physiology》:Reproducibility of smooth muscle mechanical properties in consecutive stretch and activation protocols
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为解决平滑肌(SM)实验结果重复性难题,研究人员开发三种协议,发现 P2、P3 可重现长长度初始主动力,P1 利于维持被动力,为后续研究奠定基础。
在人体的微观世界里,平滑肌(Smooth Muscle,SM)如同隐藏在各个器官中的 “幕后英雄”,悄无声息地发挥着关键作用。它广泛分布于胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道等器官,参与诸如食物消化、气体交换、尿液排出等重要生理过程。然而,想要深入了解这些器官的功能,并将相关知识应用于临床,就需要构建精准的机械器官模型,而这一模型的关键依赖于获取准确的平滑肌特性数据。
目前,在获取这些数据时却面临着重重困难。一方面,平滑肌细胞具有高度的适应性,在实验测量期间,其主动和被动特性会迅速改变。例如,不同的刺激、拉伸幅度以及休息时间,都会在几分钟到几小时内引起主动力的变化。另一方面,实验结果的可重复性也成了一大挑战。为了确保后续实验中组织行为的可重复性,常用的预处理方法虽然能让组织达到 “平衡状态”,但却会改变组织原本的机械性能,导致获取的肌肉参数无法反映初始状态。这就好比戴着有色眼镜看世界,看到的并非真实的模样。
为了突破这些困境,来自德国斯图加特大学(University of Stuttgart)和布伦瑞克工业大学(Technische Universit?t Braunschweig)的研究人员 Simon Kiem、Stefan Papenkort 等人开启了一项极具意义的研究。他们的研究成果发表在了《Pflügers Archiv - European Journal of Physiology》上。
研究人员开发了三种无需预处理的实验协议(P1、P2、P3),旨在重现平滑肌组织在拉伸和激活引起结构变化后的初始机械性能。这三种协议都包含五个重复的实验周期,在长肌肉长度下进行刺激,区别在于短肌肉长度下的刺激次数(P1:0 次,P2:1 次,P3:2 次) 。
在实验过程中,研究人员从屠宰场获取猪膀胱组织,在符合德国动物福利法的规定下开展实验。组织条被精心处理后,安装在肌肉杠杆系统上进行测试。实验过程中,对肌肉收缩进行电刺激,并通过一系列数据处理和统计分析方法,来评估平滑肌组织对不同协议的适应性。
研究结果令人眼前一亮。在主动力方面,协议 P1 的主动力随着周期增加而显著上升,而 P2 和 P3 则成功重现了长长度下的初始主动力。这意味着 P2 和 P3 在维持长长度下的主动力稳定性上表现出色。而在被动力方面,P1 在五个周期内保持了被动力的稳定,P2 和 P3 的被动力却随着周期增加而上升。此外,三种协议下应力 - 应变曲线的曲率都随着周期增加而增加,这表明被动元件中的储存能量在逐渐损失。
从适应性机制来看,现有理论认为,平滑肌长度的变化会导致收缩装置的改变,进而影响组织的主动和被动力。当肌肉长度增加时,收缩单位(肌节)会增加,以维持肌动蛋白和肌球蛋白丝的最佳重叠,从而适应新的长度;反之,肌肉长度减小时,收缩单位会减少。对于 P1,每次拉伸和等长收缩会诱导额外的肌球蛋白丝增加,而缩短组织并进行等长收缩则会阻碍这种增加,这解释了 P1 主动力的变化趋势。对于 P2 和 P3,每次额外的收缩会诱导肌动蛋白丝的皮质聚合,增加细胞或肌肉组织的刚度,导致被动力上升。
这项研究意义重大。它为获取可重复的平滑肌参数提供了新的方法,在不进行预处理的情况下,更准确地复制平滑肌组织的机械性能,为后续研究奠定了坚实的基础。同时,研究结果也加深了人们对平滑肌适应性机制的理解,为相关疾病的研究和治疗提供了新的思路。
研究人员为开展这项研究,主要采用了以下关键技术方法:
组织处理技术 :从屠宰场获取猪膀胱组织,在运输和实验过程中,将组织保存在特定的溶液中,并维持合适的温度和气体环境,确保组织的活性。
力学测试技术 :使用肌肉杠杆系统和实时软件包,记录组织在不同拉伸和收缩状态下的长度和力信号,以此来评估平滑肌的机械性能。
数据分析技术 :运用 Matlab 和 SPSS 软件对实验数据进行平滑处理、归一化处理,通过方差分析(ANOVA)和回归分析等统计方法,来判断不同协议下各参数的差异和变化趋势。
研究人员通过对不同实验方案下平滑肌组织的力学性能进行研究,发现了不同协议对主动力和被动力的影响规律,以及应力 - 应变曲线曲率的变化趋势。这些发现为平滑肌研究领域提供了重要的参考,有助于推动机械器官模型的发展,为临床应用带来新的希望。
在研究结论和讨论部分,研究人员再次强调了开发这三种实验协议的重要性。虽然这些协议与膀胱组织的生理行为存在差异,但它们为控制肌肉适应性提供了有效的手段。未来的研究可以在此基础上,进一步优化实验方案,使其更贴近生理实际情况,为深入理解平滑肌的生理和病理机制提供更多有价值的信息。
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