探寻中欧人群大前庭水管综合征致聋基因新线索

《Molecular Medicine》：Novel genetic determinants contribute to hearing loss in a central European cohort with enlarged vestibular aqueduct

为明确大前庭水管（EVA）相关听力损失遗传因素，研究人员对 32 例患者研究，发现新基因及致病机制，意义重大。

　　在人类的感官世界里，听力扮演着至关重要的角色，它让我们能够聆听美妙的音乐、与他人顺畅交流。然而，听力损失却成为了困扰众多人的难题，每 1000 名新生儿中就有 1.5 人受其影响，这也是儿童残疾的重要原因之一。在众多导致听力损失的因素中，遗传学因素占据了至少 60% 的比例，而且已知有超过 150 个基因参与听力功能，使得听力损失的遗传诊断充满挑战。大前庭水管（EVA）作为最常见的内耳畸形，常常与听力损失相伴出现。

目前，在白种人队列中，约 50% 的 EVA 患者其遗传病因仍未明确。SLC26A4 基因的双等位基因致病性变异虽然与 Pendred 综合征和非综合征性常染色体隐性听力损失 DFNB4 相关，但在 EVA 患者中，只有约 25% 能检测到该变异，还有 25% 患者携带单等位基因变异，另外 50% 则检测不到 SLC26A4 变异。其他与 EVA 相关的基因，如 FOXI1、KCNJ10、GJB2、POU3F4 等，也仅能解释部分患者的病因。因此，探寻 EVA 相关听力损失的遗传因素迫在眉睫。

为了解开这一谜团，来自奥地利的研究人员展开了深入研究。他们从萨尔茨堡总医院耳鼻喉科招募了 32 例患有听力损失和 EVA 的患者，通过一系列研究，试图确定 SLC26A4 基因致病性序列改变的患病率和类型，并发现新的 EVA 相关基因。该研究成果发表在《Molecular Medicine》杂志上。

研究人员采用了多种关键技术方法。首先，收集患者的外周血样本，提取基因组 DNA（gDNA）。接着，运用 Sanger 测序、单核苷酸多态性（SNP）检测、拷贝数变异（CNV）检测以及全外显子测序（ES）等技术对相关基因进行分析。为了判断基因变异对蛋白质功能的影响，还进行了基于细胞的功能和分子检测。

研究结果显示：

• 患者临床特征：32 例患者中，多数为感音神经性听力损失（29/32，91%），部分为传导性（2/32，6%）或混合性（1/32，3%）听力损失，且多伴有双侧（27/32，84%）或单侧（5/32，16%）EVA，部分患者存在耳蜗不完全分隔（IP2 或 IP3）。
• 已知 EVA 基因变异检测：在 GJB2 基因中，发现常见致病性变异 c.35delG，2/32（6%）患者为纯合子，1/32（3%）患者为杂合子。SLC26A4 基因方面，5/32（16%）患者检测到双等位基因致病性变异，其中 1 例因高氯酸盐排出试验阳性诊断为 Pendred 综合征；5/32（16%）患者检测到单等位基因变异。此外，在 POU3F4 基因中，2/32（6%）患者检测到致病性变异。
• SLC26A4 变异致病性评估：通过细胞功能检测，对 SLC26A4 基因中多个导致氨基酸替换的变异进行评估。结果发现，p.Y78C、p.Q101R 等变异导致离子转运功能显著降低，被归类为功能丧失变异；p.I136N、p.L597S 等变异离子转运功能有所降低，但高于空载体，被归类为残留功能变异；p.G740V 变异与野生型无异，被归类为功能完整变异。
• CEVA 单倍型检测：在 7/32（22%）患者中检测到 CEVA 单倍型，但由于其与 SLC26A4 变异的连锁关系复杂，难以确定其致病性。
• 全外显子测序：对 11 例双侧 EVA 且已知致病基因检测阴性的患者进行 ES，在 5/32（16%）患者中检测到 7 个罕见变异，涉及 6 个以前与 EVA 无关的基因，如 SCD5、REST、EDNRB 等。
• TJP2 变异致病性分析：针对 TJP2 基因中 c.1907C>G 变异（p.T636R），细胞实验表明该变异导致蛋白质产物定位异常，能与野生型形成二聚体，支持其常染色体显性致病性。

研究结论和讨论部分指出，本研究证实了 SLC26A4 基因在 EVA 相关听力损失中的作用，通过功能检测明确了部分变异的致病性。发现了新的 EVA 相关基因，如 TJP2，为疾病的发病机制提供了新的见解。然而，仍有 44%（14/32）的患者听力损失和 EVA 的遗传病因未明确，这意味着可能存在尚未发现的致病基因或非编码序列变异。未来需要进一步研究 CEVA 单倍型的致病机制，以及在其他 EVA 队列中验证这些罕见基因的作用。该研究为听力损失和 EVA 的遗传诊断和治疗提供了重要的理论依据，对改善患者的临床管理具有重要意义。