凝血相关基因在胶质母细胞瘤研究中的重大发现：预测预后与开拓治疗新方向

《Biochemical Genetics》：The Role of Coagulation-Related Genes in Glioblastoma: A Comprehensive Analysis of the Tumor Microenvironment, Prognosis, and Treatment

为探究凝血相关基因（CRGs）对胶质母细胞瘤（GBM）的影响，研究构建风险模型，助力预后预测与治疗策略开发。

　　胶质母细胞瘤（GBM）是一种恶性程度极高的脑部肿瘤，凝血对胶质瘤生物学的影响尚未完全明晰。此次研究从肿瘤微环境（TME）、GBM 患者凝血功能差异、治疗以及预后等多个角度，深入探索凝血相关基因（CRGs）在 GBM 中的作用。研究人员对来自癌症基因组图谱（TCGA）队列中 GBM 患者的单核苷酸多态性（SNP）和拷贝数变异数据进行体细胞突变分析；运用公开的单细胞 RNA 测序数据，剖析凝血在 GBM 的 TME 中的作用及其潜在生物学机制。

研究人员对中国胶质瘤基因组图谱（CGGA693）队列中的 GBM 患者进行无监督聚类，并通过单样本基因集富集分析（ssGSEA）评分评估每位患者的凝血功能。借助 Kaplan - Meier 生存分析评估预后情况，利用 ESTIMATE 算法分析免疫浸润。基于 CFI、GNG12、MMP2、LEFTY2 和 SERPINC1 这 5 个 CRGs 构建风险特征模型，并运用套索（LASSO）回归和随机生存森林分析进行验证，以此预测免疫治疗的反应并识别潜在的敏感药物。

最后，通过免疫组织化学、细胞计数试剂盒 - 8（CCK8）检测和划痕愈合实验，验证 LEFTY2 和 SERPINC1 在 GBM 进展中的作用；通过 CCK8 检测、划痕愈合实验和集落形成实验，验证药物 PLX4720 的抗 GBM 效果。

体细胞突变分析显示，在 461 例 GBM 病例中，有 117 例（25.38%）出现 CRG 突变的 SNP 事件。GBM 的 TME 单细胞分析表明，内皮细胞中的凝血途径显著激活，细胞间通讯通过 SPP1 - 整合素途径介导（p < 0.01）。聚类分析和 ssGSEA 识别出 GBM 中两种凝血相关亚型：凝血激活亚型和凝血抑制亚型。与凝血抑制亚型患者相比，凝血激活亚型患者的总生存期更短，预后更差（p = 0.0085）。免疫浸润分析表明，凝血激活亚型的肿瘤纯度更低，免疫抑制细胞水平更高（p < 0.001） 。

基于 CRGs 的风险特征模型能准确预测预后（p < 0.0001），并在 IMvigor210 队列中预测免疫治疗反应（p = 0.0062）。基于风险模型，PLX4720 被确定为潜在敏感药物（p < 0.001），药物验证实验证明 PLX4720 可抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移（p < 0.0001）。体外实验表明，与正常脑组织相比，LEFTY2 和 SERPINC1 在 GBM 中显著过表达，敲低 LEFTY2 和 SERPINC1 可抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移（p < 0.05）。

综上，基于 CRGs 的风险特征模型能有效预测 GBM 患者的预后，有助于评估免疫检查点抑制剂（ICI）治疗和化疗的疗效。此外，LEFTY2、SERPINC1 基因以及 PLX4720 药物为 GBM 新型治疗策略的开发提供了潜在方向。