前体诱导促进长柄萼距花细胞悬浮培养物中 L-DOPA 高效生物合成
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时间:2025年03月22日
来源:Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC) 2.3
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为提升 L-DOPA 产量,研究人员对长柄萼距花细胞培养物开展研究,发现前体诱导可增产,具商业潜力。
长柄萼距花(Hybanthus enneaspermus (L.) F.Muell.)因具有产生左旋多巴(L-Dopa)的潜力而在医学领域备受关注。本研究旨在探索通过前体添加诱导长柄萼距花细胞培养物,实现体外代谢物(L-Dopa)的持续生物合成。研究人员从长柄萼距花的茎节诱导出疏松愈伤组织,并由此建立了长柄萼距花细胞悬浮培养物(CSCH)。此次研究考察了前体物质和多胺对生物量、L-Dopa 含量以及抗氧化代谢物的影响。研究采用浓度梯度法,将酪氨酸(TYS)、苯丙氨酸(PHE)等氨基酸前体,以及亚精胺(SPD)、精胺(SPM)和腐胺(PRC)等多胺,分别在不同阶段(2 天、4 天和 6 天)添加到细胞培养物中。在众多前体和多胺中,150 μM 的 TYS 使生物量和 L-Dopa 水平相较于未诱导细胞分别提高了 1.75 倍和 12.75 倍。与多胺相比,前体物质在提高生物量和 L-Dopa 产量方面效果更为显著。在生产效率方面,前体和多胺的效果排序为:TYS>PHE>SPD>SPM>PRC。此外,研究还深入探究了前体和多胺对诱导细胞中关键生理指标的影响,这些指标包括过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和抗坏血酸过氧化物酶(APx)。在各类酶活性变化中,200 μM 的 TYS 使 CAT 活性相较于未诱导细胞提高了 9.94 倍。该研究表明,前体添加和诱导能显著促进 CSCH 中 L-Dopa 的合成。这些研究成果有望应用于利用 CSCH 进行商业规模的 L-Dopa 生产,为合成来源提供可持续的替代方案。
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