宿主防御机制新视角：中性粒细胞与铜绿假单胞菌生物膜的蛋白质组重塑研究

《Microbiology Resource Announcements 0.7》：Remodeling of the neutrophil proteome upon exposure to Pseudomonas aeruginosa biofilms

本研究聚焦于中性粒细胞与铜绿假单胞菌生物膜的相互作用，揭示了宿主防御反应中的蛋白质组重塑，为感染机制研究提供了新见解。

　　中性粒细胞在先天免疫系统中扮演着重要角色，是抵御入侵病原体的第一道防线。然而，病原体如铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）通过形成生物膜来抵抗宿主防御和抗生素治疗。本研究通过蛋白质组学方法，分析了中性粒细胞（由HL-60细胞分化而来）与铜绿假单胞菌生物膜共培养后的蛋白质组重塑情况。

研究人员将HL-60细胞培养于含有10%胎牛血清、1% L-谷氨酰胺和1%抗生素-抗真菌剂的RPMI 1640培养基中，维持在37℃、5% CO₂条件下，并定期添加1.25%二甲基亚砜促进中性粒细胞分化。铜绿假单胞菌PAO1菌株被用于生物膜的制备，通过结晶紫染色法确认生物膜的形成。中性粒细胞与生物膜以1:100的感染复数共培养4小时后，通过超声破碎、细胞刮取和离心收集样本，并进行蛋白质提取和分析。

实验结果显示，共鉴定出4908种宿主蛋白和659种细菌蛋白。主成分分析表明，感染和未感染样本在成分1（51.4%）维度上存在聚集，在成分2（13.9%）维度上生物重复样本分离。宿主蛋白的热图显示，未感染中性粒细胞与感染中性粒细胞的重复样本可重复性分别为91.5%和92.1%。火山图显示，与感染样本相比，未感染中性粒细胞中有475种宿主蛋白显著增加，而感染样本中有132种宿主蛋白显著增加，包括与免疫反应相关的关键蛋白（如中性粒细胞弹性蛋白酶）。

本研究为中性粒细胞在铜绿假单胞菌生物膜暴露下的蛋白质组重塑提供了新的见解，支持进一步探索宿主防御的生物学驱动因素。