非洲猪瘟疫苗研究新突破：B125R基因缺失株的保护效果显著提升

《npj Vaccines》：Deletion of B125R increases protection induced by a genotype II African swine fever vaccine candidate

本研究聚焦非洲猪瘟疫苗开发难题，针对基因II型非洲猪瘟病毒，研究人员构建并评估了缺失B125R基因的疫苗候选株GΔBDKE-CmutQ96R/K108D，发现其在不同剂量下均能显著提升对猪的保护效果，为非洲猪瘟防控提供了新的疫苗研发思路，具有重要科学和应用价值。

　　 非洲猪瘟（African Swine Fever, ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine Fever Virus, ASFV）引起的一种对家猪和野猪具有极高致死率的传染病，给全球养猪业带来了巨大的经济损失和食品安全威胁。ASFV是一种复杂的双链DNA病毒，具有多种基因型，其中基因II型在近年来的疫情中尤为突出，曾在格鲁吉亚、俄罗斯、东欧以及中国等多地引发严重疫情。尽管已有部分改良活疫苗（Modified Live Vaccine, MLV）在越南获得许可使用，但其广泛推广仍面临诸多挑战。开发一种安全、高效且能区分自然感染与疫苗接种的疫苗（DIVA，Differentiating Infected from Vaccinated Animals），一直是科研人员努力的方向。

为此，英国皮尔布莱特研究所（The Pirbright Institute）的研究人员开展了相关研究。他们基于之前构建的基因II型ASFV改良活疫苗候选株GΔDKE-CmutQ96R/K108D，进一步通过删除B125R基因来优化疫苗性能。研究结果表明，缺失B125R基因的疫苗候选株GΔBDKE-CmutQ96R/K108D在不同剂量（从102到10? TCID??）下对猪的保护效果均达到100%，且在免疫后观察到的临床症状轻微或无明显症状。此外，该疫苗候选株在猪体内引起的病毒复制水平较低，仅在少数猪体内检测到低水平的挑战病毒复制。研究人员还发现，B125R蛋白具有免疫原性，有望作为DIVA策略的血清学标志物，但实际应用中可能还需要结合其他标志物。

在研究过程中，研究人员首先通过转染表达ASFV不同基因的质粒，筛选出B125R蛋白作为潜在的DIVA标志物。接着，他们利用Cre/loxP重组系统，先去除GΔDKE-CmutQ96R/K108D中的荧光蛋白基因标记，再通过单细胞分选和限制性稀释等技术，成功构建了缺失B125R基因且带有tdTomato荧光蛋白标记的重组病毒GΔBDKE-CmutQ96R/K108D。在体外实验中，该重组病毒在猪巨噬细胞中的复制动力学与野生型病毒相似，但最终病毒滴度约低10倍。在体内实验中，研究人员对猪进行不同剂量的免疫，并在免疫后42天或44天进行挑战实验。结果显示，无论是一次免疫还是两次免疫的猪群，在挑战后均未出现严重临床症状，且大部分猪体内未检测到病毒复制。此外，研究人员还检测了免疫猪群的抗体和细胞免疫反应，发现无论剂量和免疫方案如何，免疫猪群均能产生较强的细胞免疫反应，且在免疫后28天内所有猪均产生了针对p72蛋白的抗体。

尽管该研究取得了令人鼓舞的结果，但也存在一些需要进一步探讨的问题。例如，B125R基因缺失对病毒致病性的影响尚不完全清楚，且在实际应用中，DIVA策略的有效性还需要更多的实验验证。此外，疫苗的长期保护效果、在不同猪群中的适应性以及与现有防控措施的协同作用等，都需要进一步研究。然而，这项研究无疑为非洲猪瘟疫苗的研发提供了新的思路和方向，其成果有望在未来转化为实际的防控手段，为全球养猪业的可持续发展提供有力支持。