从传统中药中挖掘抗癌新希望：鹰爪豆素对肺癌的抑制作用研究

《BMC Cancer》：Texasin, A main product from Caragana Jubata (Pall.) Poir, induces proliferation arrest and protective autophagy in lung adenocarcinoma

为解决肺癌治疗难题，研究人员探究鹰爪豆素（Texasin）对肺癌细胞作用，发现其可抑制肺癌，极具治疗潜力。

　　肺癌，这一全球健康的 “头号杀手”，正以惊人的速度夺走人们的生命。据美国癌症协会估计，2024 年全球新增癌症病例约 2001140 例，其中肺癌相关死亡约占癌症总死亡的 20% 。非小细胞肺癌（NSCLC）作为肺癌的主要类型，约占所有肺癌病例的 85%。多数 NSCLC 患者早期症状隐匿，确诊时往往已至晚期，手术治疗效果不佳，预后较差。以顺铂为基础的化疗虽为晚期肺癌一线治疗方案，但铂类药物的显著毒副作用使得许多患者难以从中获益。此外，针对 KRAS 突变（约占肺腺癌病例的 25 - 30%）的肺癌治疗，因 KRAS 蛋白表面缺乏传统小分子药物结合位点及突变亚型高度异质性，面临重重挑战。

在这样的困境下，扬州大学附属苏北人民医院的研究人员将目光投向了传统中药。鹰爪豆素（Texasin）是从传统中药金雀儿（Caragana jubata）中提取的成分，金雀儿在古代医书中就有用于治疗咳嗽、呼吸虚弱及解毒的记载，目前临床也用于肺癌等肿瘤治疗，但其主要活性成分鹰爪豆素对肺癌的作用此前尚未有研究报道。为了探究鹰爪豆素对肺癌的影响，研究人员开展了一系列实验，并将研究成果发表在《BMC Cancer》上。

研究人员采用了多种关键技术方法。细胞实验方面，运用细胞计数试剂盒 - 8（CCK - 8）、EdU 细胞增殖实验、划痕愈合实验、Transwell 实验等检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力；通过蛋白质免疫印迹、免疫荧光等技术检测相关蛋白表达；利用 β - 半乳糖苷酶染色、流式细胞术分析细胞衰老和细胞周期分布。动物实验则构建了肺癌荷瘤小鼠模型，进行小动物体内成像和免疫组化分析。同时，对 A549 细胞进行转录组测序，以探究鹰爪豆素抑制肺癌的潜在机制。

研究结果如下：

• 鹰爪豆素抑制肺癌细胞活力且低毒：CCK - 8 实验表明，鹰爪豆素对肺癌细胞（H1299 和 A549）的增殖具有显著抑制作用，且呈剂量和时间依赖性，而对正常肺胚胎细胞 MRC - 5 无明显毒性。Calcein/PI 染色实验也证实，高浓度（80μM）鹰爪豆素不会诱导肿瘤细胞死亡，而阳性对照药物顺铂（DDP，20μM）则导致大量细胞死亡。
• 抑制肺癌细胞增殖能力：EdU 实验显示，经鹰爪豆素处理 48 小时后，肺癌细胞中分裂细胞的比例显著下降，同时肺癌细胞增殖标记物 PCNA 的蛋白丰度也明显降低。
• 抑制肺癌细胞迁移和侵袭：划痕愈合实验和 Transwell 实验结果表明，经鹰爪豆素处理 24 小时后，肺癌细胞的迁移和侵袭能力显著降低。在划痕愈合实验中，H1299 和 A549 细胞的伤口愈合率均大幅下降；Transwell 实验中，穿过滤膜的 H1299 和 A549 细胞数量明显减少。
• 通过促进细胞衰老和细胞周期阻滞抑制肺癌：转录组测序及 KEGG 分析发现，鹰爪豆素显著调节细胞衰老和细胞周期相关基因。实验证实，经鹰爪豆素处理 48 小时后，肺癌细胞中 β - 半乳糖苷酶活性显著增加，肿瘤抑制蛋白 RB 表达上调，同时细胞周期中 G₁期分布增加，S 期分布减少。
• 诱导肺癌细胞保护性自噬：研究发现，鹰爪豆素处理后，H1299 和 A549 细胞中 LC3B 蛋白大量积累，表明自噬体增多。通过 RFP - GFP - LC3B 报告系统进一步研究发现，鹰爪豆素处理后多数自噬体与溶酶体融合完成自噬流。当使用自噬抑制剂氯喹（CQ）阻断自噬时，细胞活力进一步下降，且细胞发生凋亡，说明鹰爪豆素诱导的自噬是肺癌细胞对药物的适应性保护反应。
• 抑制体内肺癌进程：肺癌荷瘤小鼠模型实验显示，与阳性对照药物 DDP 相比，鹰爪豆素治疗后肿瘤体积减小，肿瘤荧光强度降低，肿瘤重量显著减轻，且小鼠体重无明显变化。肿瘤免疫组化分析表明，鹰爪豆素处理后 Ki67 表达下降，自噬相关标记物 LC3B 增加，P62 减少，说明鹰爪豆素显著影响自噬水平。

研究结论和讨论部分指出，鹰爪豆素对肺癌具有显著的抑制活性，且对正常肺胚胎细胞毒性较低。其可能通过促进细胞衰老和细胞周期阻滞，诱导保护性自噬等机制抑制非小细胞肺癌的生长和侵袭。鹰爪豆素对携带 KRAS 突变的 A549 细胞仍有抑制作用，这为 KRAS 突变型肺癌的治疗提供了新的希望。不过，鹰爪豆素的作用靶点尚不明确，后续研究可进一步揭示其生物学靶点，以更好地解释其抑制肺癌细胞增殖的具体原因。总体而言，该研究为肺癌治疗提供了一种极具潜力的新型化合物，有望推动肺癌治疗领域的发展，为众多肺癌患者带来新的曙光。