疫苗新突破：ISA 61 VG佐剂灭活疫苗对单增李斯特菌的广谱保护作用

《Veterinary Research》：The inactivated and ISA 61 VG adjuvanted vaccine enhances protection against cross-serotype Listeria monocytogenes

本研究针对单增李斯特菌（Listeria monocytogenes，Lm）感染问题，开发了基于ISA 61 VG佐剂的灭活疫苗（61 VG-AIV），在小鼠和绵羊模型中验证了其安全性、免疫原性和广谱保护效果，为防控动物李斯特病提供了新策略，具有重要的公共卫生和畜牧业意义。

　　单增李斯特菌（Listeria monocytogenes，Lm）是一种广泛存在于自然环境中的致病菌，可感染多种动物和人类，引发严重的李斯特病，对公共卫生和畜牧业构成重大威胁。Lm具有复杂的血清型，不同血清型之间存在抗原差异，这给疫苗研发带来了挑战。目前，市场上尚无针对人或动物李斯特病的商业化疫苗，开发有效的疫苗以防控Lm感染迫在眉睫。

扬州大学的研究人员聚焦于这一问题，开展了基于ISA 61 VG佐剂的灭活疫苗（61 VG-AIV）的研究。他们以Lm血清型4h的XYSN株为基础，制备了灭活疫苗，并分别在小鼠和绵羊模型中进行了安全性、免疫原性和保护效果的评估。研究结果表明，61 VG-AIV在两种动物模型中均表现出良好的安全性，能够诱导强烈的体液免疫反应和偏向Th1的细胞免疫反应，并且对Lm的多种血清型（包括4h、1/2a、1/2b和4b）具有广谱保护效果。该研究为开发针对Lm感染的新型疫苗提供了有力的科学依据，有望填补当前疫苗领域的空白。

在研究方法上，研究人员采用了以下关键技术：首先，对Lm XYSN株进行培养和灭活处理，制备灭活疫苗；其次，利用ISA 61 VG佐剂与灭活疫苗混合，增强免疫原性；接着，在小鼠和绵羊模型中进行免疫接种，并分别在免疫后不同时间点采集样本，用于检测抗体水平、细胞因子表达以及评估器官病理变化；最后，通过挑战实验评估疫苗的保护效果，即用不同血清型的Lm对免疫后的动物进行攻击，观察其生存率和器官中细菌载量。

在安全性评估方面，研究人员观察了免疫后小鼠和绵羊的体重变化、体温变化以及器官病理切片，结果显示61 VG-AIV未引起明显的不良反应或组织损伤。在免疫原性研究中，通过间接ELISA检测小鼠和绵羊血清中Lm特异性IgG抗体水平，发现61 VG-AIV能够诱导显著高于铝佐剂灭活疫苗（Al-AIV）的抗体滴度，且抗体反应持续时间较长。此外，通过qRT-PCR检测小鼠脾细胞中细胞因子mRNA表达水平，发现61 VG-AIV能够显著提高促炎细胞因子（如IL-6、IL-17、TNF-α和IFN-γ）的表达，而抗炎细胞因子IL-4的表达水平则无显著差异，表明61 VG-AIV诱导了更强的Th1型免疫反应。

在保护效果方面，研究人员对免疫后的小鼠和绵羊进行了不同血清型Lm的挑战实验。结果显示，61 VG-AIV在小鼠中对4h血清型Lm的保护率达到83.4%，显著高于Al-AIV（50%）；并且对1/2a、1/2b和4b血清型Lm也表现出不同程度的交叉保护效果。在绵羊模型中，61 VG-AIV同样展现出良好的保护效果，免疫组绵羊的生存率达到83.4%，而对照组则全部死亡。此外，免疫后120天的小鼠再次接受挑战实验，61 VG-AIV组的保护率仍可达83.4%，表明该疫苗具有长期的免疫保护能力。

该研究的结论强调了ISA 61 VG佐剂在增强灭活疫苗免疫原性方面的优势，尤其是在诱导Th1型免疫反应和提供广谱保护方面。这一发现为未来开发针对Lm感染的新型疫苗提供了重要的参考，也为其他病原体的疫苗研发提供了有价值的借鉴。通过这种创新的疫苗策略，有望有效降低Lm感染对公共卫生和畜牧业造成的威胁，具有重要的科学和社会意义。