墨西哥医疗中心 3 例肢带型肌营养不良患者的遗传与表型特征研究：拓展疾病认知边界

《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》：Genetic and phenotypic characteristics of 3 patients with limb-girdle muscular dystrophy: experience in a medical center in Mexico

研究针对肢带型肌营养不良（LGMD）诊断难题，分析 20 例患者，确诊 3 例并发现新变异，拓展了认知。

　　

研究背景：探索肢带型肌营养不良的神秘面纱

在医学的神秘领域中，肢带型肌营养不良（Limb-girdle muscular dystrophy，LGMD）是一类极为特殊的疾病。它如同隐匿在人体肌肉深处的 “暗箭”，属于遗传性肌肉疾病，会悄无声息地侵蚀肌肉，使患者的肢体近端肌肉，如骨盆、肩胛周围的肌肉逐渐变得无力、萎缩，严重影响患者的生活质量。

由于 LGMD 在遗传和表型上存在高度的异质性，不同患者之间的症状差异极大，这给临床诊断带来了巨大的挑战。就像面对一幅错综复杂的拼图，每一块都长得不太一样，很难找到明确的诊断线索。尽管某些特征，比如特定类型的 LGMD 患者体内肌酸激酶（CK）会大幅升高，可这也只是茫茫迷雾中的一丝微弱光亮，并不能帮助医生准确判断具体的疾病类型。

目前，遗传检测被视为解开 LGMD 诊断谜题的关键钥匙。然而，在墨西哥，关于 LGMD 的遗传变异和临床特征的研究却非常有限，就像一片等待开垦的荒地，几乎没有形成全国性的诊断和监测策略。为了填补这一空白，来自墨西哥多家机构的研究人员踏上了探索之旅，他们的研究成果发表在《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》杂志上。

研究方法：开启探索 LGMD 的技术之旅

研究人员为了深入了解 LGMD，从 2016 年 1 月至 2018 年 12 月，在墨西哥总医院的神经遗传学门诊，通过方便抽样的方式招募患者。这些患者都表现出疑似肌肉营养不良的症状，并且经过自动化 LGMD 诊断辅助工具（ALDA）评估，患 LGMD 的概率大于 50%。

研究人员采集了患者的血液样本，用于后续检测。一方面，收集滤纸干血斑用于下一代测序（Next-generation sequencing，NGS），它就像一个强大的 “基因探测器”，能同时检测多个基因；另一方面，采集 10mL 静脉血置于 EDTA 管，用于 Sanger 测序，这是一种更精准的 “基因验证器”，可以对 NGS 检测出的变异进行确认。

在基因检测过程中，研究人员使用了包含 10 个与常染色体隐性遗传 LGMD 相关基因的检测 panel ，涵盖 ANO₅、CAPN₃、DYSF 等基因。检测完成后，依据美国医学遗传学与基因组学学会（ACMG）的标准对检测到的变异进行分类，判断其致病性。

研究结果：揭开 LGMD 的神秘一角

研究共纳入了 20 例患者，其中男性 12 例，女性 8 例。经过基因检测，最终确诊了 3 例 LGMD 患者，确诊率为 15%。

• LGMD R₂ DYSF 相关的患者：P1 患者在 DYSF 基因上存在纯合单核苷酸变异（SNV），即 DYSF:c.6241C>T（rs121908955），导致 p.Arg2081Cys 氨基酸替换。他在 26 岁时出现症状，30 岁接受评估，表现为骨盆带近端肌肉无力、下肢肌肉对称萎缩，肌电图显示近端肌病模式，CK 血清水平升高。P2 患者则是 DYSF:c.4307G>A（rs398123787）纯合变异，8 岁发病，28 岁评估时出现骨盆带近端肌肉无力、下肢运动后疼痛，肌电图和 CK 血清水平也呈现异常。
• LGMD R₁ CAPN₃相关的患者：P3 患者被诊断为与钙蛋白酶（calpain）相关的 LGMD，是由 CAPN₃基因变异引起的。他是复合杂合子，携带两个变异，一个是 CAPN₃:c.481G>A（rs1566974488），另一个是之前未报道过的 CAPN₃:c.1771_1772insT，导致 p.Asp591fs*40 截断。16 岁出现症状，18 岁评估时下肢和肩带部分近端无力，跟腱挛缩，肌电图和 CK 血清水平也有相应变化。
• 其他有 LGMD 表型但未确诊的患者：P4 和 P5 患者虽然表现出 LGMD 的临床特征，但分子检测仅发现 DYSF 基因的单个变异，无法确诊。P4 上肢远端肌肉无力、近端关节挛缩等，P5 肩胛骨近端肌肉无力、翼状肩胛和面部无力。

研究结论与讨论：照亮 LGMD 研究的前路

此次研究成功确诊并详细描述了 2 例 LGMD R₂ DYSF 相关和 1 例 LGMD R₁ CAPN₃相关的患者，还发现了 CAPN₃基因的一种新型致病性移码变异。这不仅丰富了人们对 LGMD 遗传和表型的认知，也为临床遗传检测提供了更多有价值的信息。

研究中 ALDA 工具在预测 LGMD 类型上发挥了一定作用，对于确诊的 P1 - P3 患者，其预测结果与基因诊断相符，这表明该工具在指导诊断方面具有一定的实用性。不过，研究也存在一些局限性。检测 panel 仅包含 10 个基因，可能会遗漏其他致病基因；没有进行组织病理学分析，无法从更微观的层面了解疾病；对 ALDA 工具的评估不够系统；抽样方法为方便抽样，研究结果难以推广到更广泛的人群。

尽管如此，这项研究依然为后续的 LGMD 研究指明了方向。未来，需要开展更大规模、多机构协作的研究，使用更全面的基因检测技术，进一步深入探索 LGMD 在墨西哥人群中的遗传和表型特征，为攻克这一难题奠定更坚实的基础。