AAV2-shmTOR基因疗法在AMD治疗中的潜力：抗炎与保护视网膜内皮完整性

《Scientific Reports》：Therapeutic potential of AAV2-shmTOR gene therapy in reducing retinal inflammation and preserving endothelial Integrity in age-related macular degeneration

本研究针对AMD炎症和氧化应激问题，开展AAV2-shmTOR基因疗法研究，发现其可有效降低炎症因子表达、保护视网膜内皮屏障功能，为AMD治疗提供新思路。

　　年龄相关性黄斑变性（AMD）是一种导致中央视力丧失的常见视网膜疾病，其发病机制复杂，炎症和氧化应激在AMD的进展中起着关键作用。目前的AMD治疗主要集中在抑制血管内皮生长因子（VEGF）以控制异常血管生长，但对于干性AMD以及对VEGF抑制剂无反应的湿性AMD患者，治疗选择有限。因此，寻找能够同时针对炎症和氧化应激的治疗方法具有重要意义。

韩国CdmoGen公司的研究人员开展了一项研究，探索AAV2-shmTOR基因疗法在AMD治疗中的潜力。该研究通过体外实验，发现AAV2-shmTOR能够有效降低TNF-α诱导的炎症因子表达，保护视网膜内皮细胞的紧密连接完整性，并减少氧化应激和细胞毒性。这些发现为AMD的治疗提供了新的策略，研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员采用的主要关键技术方法包括：利用AAV2载体递送针对mTOR的shRNA以实现基因沉默；通过免疫印迹（Western blotting）、酶联免疫吸附测定（ELISA）检测炎症因子表达水平；利用免疫荧光观察视网膜内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1的表达和分布；通过OxyBlot检测蛋白氧化水平评估氧化应激；采用乳酸脱氢酶（LDH）释放实验评估细胞毒性。

研究结果表明，TNF-α显著增加了人微胶质细胞（HMC3）中IL-6和IL-1β的表达和分泌，并破坏了人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的紧密连接，表现为ZO-1染色减弱和屏障功能受损。AAV2-shmTOR处理显著降低了TNF-α诱导的HMC3细胞中IL-6、IL-1β和NF-κB信号通路的激活，并有效保护了TNF-α处理的HUVEC细胞的紧密连接完整性。此外，AAV2-shmTOR处理的HMC3细胞的上清液减少了视网膜色素上皮细胞（ARPE）中的氧化应激、蛋白氧化和细胞毒性。

研究结论指出，AAV2-shmTOR作为一种基因治疗策略，通过靶向mTOR通路，能够有效抑制AMD相关炎症反应，保护视网膜内皮细胞的完整性，并减少氧化应激。这一发现为AMD的治疗提供了新的思路，尤其是对于那些对传统VEGF抑制剂治疗无反应的患者。未来的研究将进一步探索AAV2-shmTOR在体内模型中的疗效和安全性，以期为AMD患者提供更有效的治疗选择。