乳腺癌诊断新突破：PDL1通路及相关 microRNA 的临床潜力

《Molecular Medicine》：The clinical potential of PDL-1 pathway and some related micro-RNAs as promising diagnostic markers for breast cancer

为探究乳腺癌（BC）诊断新标志物，研究人员检测 BC 患者外周血相关指标，发现其可作诊断标志物，意义重大。

　　在全球范围内，乳腺癌（Breast Cancer，BC）如同笼罩在女性健康上空的一片阴霾，严重威胁着女性的生命健康。它是女性群体中最为常见的恶性肿瘤，也是癌症相关死亡的第二大主因 ，2022 年，其导致的死亡人数占全球女性总死亡人数的 15%。

在过去的数年里，尽管出现了一些预后和预测生物标志物，为 BC 患者的个性化治疗提供了指引，美国癌症联合委员会（AJCC）第八版分期系统也纳入了多种分子标记物，但在乳腺癌的早期精准检测和诊断方面，仍然存在着诸多挑战。免疫系统在 BC 的发展和进程中扮演着至关重要的角色，免疫检查点分子如程序性死亡配体 1（Programmed Death Ligand 1，PD-L₁）、程序性细胞死亡蛋白 1（Programmed Cell Death Protein 1，PD-1）、细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原 4（Cytotoxic T-Lymphocyte–Associated Antigen 4，CTLA-4）等，在癌症的发展以及免疫治疗中发挥着关键作用。然而，这些分子在 BC 患者外周血中的水平变化及其诊断价值，尚未得到充分的研究。

为了深入探索这些未知领域，来自开罗大学的研究人员开展了一项极具意义的研究。他们的研究成果发表在《Molecular Medicine》杂志上，为乳腺癌的诊断带来了新的曙光。

研究人员采用了病例对照研究的方法，选取了 90 名在开罗大学国家癌症研究所确诊的 BC 女性患者，并以 30 名年龄和性别相匹配的健康个体作为对照。在患者接受可能影响基因表达的治疗之前，采集他们的外周血样本，同时收集对照个体的外周血样本。

在实验过程中，研究人员运用了多种关键技术方法。首先，通过 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（Peripheral Mononuclear Cells，PMNCs），接着使用 miRNeasy Mini Kit 提取总 RNA，并将其转录为互补 DNA（Complementary DNA，cDNA）。之后，利用定量实时 PCR（Quantitative Real-Time PCR，qRtPCR）技术检测 PD-L₁、CTLA-4、PD-1、叉头盒蛋白 P3（Forkhead box P3，FOXP₃）、miR-155、miR-195 的表达水平。同时，采用酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）技术评估可溶性 MHC I 类链相关蛋白 B（soluble MHC class I chain related-protein B，MIC-B）的血浆水平。最后，运用统计学方法对数据进行深入分析。

在研究结果部分，研究人员发现，BC 患者外周血中 PD-L₁、CTLA-4、PD-1、FOXP₃和 miR-155 的表达水平相较于正常对照组有显著提升，而 miR-195 的表达则显著下调。同时，BC 患者血浆中 MIC-B 的水平也明显高于对照组。

进一步分析发现，FOXP₃的表达水平在肿瘤 3 级的 BC 患者中显著增加；miR-155 的表达在有远处肿瘤转移的患者中显著上调；miR-195 的表达在右侧 BC 患者中较高，在雌激素受体（Estrogen Receptor，ER）和孕激素受体（Progesterone Receptor，PR）阳性的患者中较低。然而，MIC-B 的表达与患者的临床病理特征之间并无显著关联。

通过受试者工作特征曲线（Receiver Operating Characteristic Curve，ROC）分析，研究人员评估了各标志物的诊断价值。结果显示，PD-L₁、CTLA-4、PD-1、FOXP₃在区分 BC 患者时，特异性均达到 100%，敏感性分别为 93.3%、82.2%、62.2%、71.1%。miR-155 的敏感性为 88.9%，特异性为 96.7%，曲线下面积（Area Under Curve，AUC）为 0.934；miR-195 的敏感性为 73.3%，特异性为 60%，AUC 为 0.716；MIC-B 的敏感性为 77.8%，特异性为 80%，AUC 为 0.811。当联合检测 PD-L₁和 CTLA-4 时，敏感性和特异性均达到 100%；联合检测 miR-155 和 miR-195 时，敏感性为 91.1%，特异性为 96.7%，AUC 为 0.926。

此外，研究人员还进行了相关性分析和回归分析。结果发现，MIC-B 的表达与 miR-195 呈显著负相关，miR-155 的表达与 FOXP₃呈显著正相关，与 miR-195 呈显著负相关。多变量回归分析表明，PD-L₁、CTLA-4、PD-1、MIC-B、miR-155 和 miR-195 均被视为 BC 的独立危险因素。

综合研究结果和讨论部分，这项研究具有重要的意义。它首次证实了 PD-L₁、CTLA-4、PD-1、FOXP₃、MIC-B、miR-155 和 miR-195 的外周血水平有望成为 BC 患者的诊断标志物。联合检测 PD-L₁和 CTLA-4，以及联合检测 miR-155 和 miR-195，能够显著提高诊断的准确性。这不仅为乳腺癌的早期诊断提供了新的思路和方法，也为个性化免疫治疗的发展奠定了坚实的基础，让我们在对抗乳腺癌的道路上迈出了重要的一步，为众多 BC 患者带来了新的希望。