《Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)》:CaO nanoparticles improve salt stress tolerance in diploid and tetraploid alfalfa (Medicago sativa L.) by modulating miRNA expression and physiological responses
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为探究盐胁迫和 CaO 纳米颗粒(CaO NP)对苜蓿的影响,研究发现 CaO NP 可缓解盐胁迫,且四倍体苜蓿更耐盐。
在广袤的农业天地里,苜蓿作为一种重要的牧草,其产量和质量受到多种因素的制约,盐胁迫便是其中的 “大麻烦”。盐胁迫就像一个无形的杀手,不仅会干扰苜蓿的生长发育,导致其产量大幅下降,还会降低苜蓿的营养价值。传统的育种方法虽然培育出了一些耐盐品种,但面对日益严重的土壤盐碱化问题,这些方法显得有些力不从心。因此,寻找新的策略来提高苜蓿的耐盐性迫在眉睫。
来自土耳其卡凡卡斯大学(Kafkas University)的研究人员勇挑重担,开展了一项极具意义的研究。他们将目光聚焦在盐胁迫(NaCl)和 CaO 纳米颗粒(CaO NP)上,探究二者对二倍体(Bilensoy)和四倍体(Alsancak)苜蓿品种的影响,包括 miRNA 表达水平、生理和生化参数的变化。这项研究成果发表在《Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)》上,为苜蓿抗盐研究开辟了新的道路。
在研究方法上,研究人员主要采用了以下关键技术:首先,通过特定的实验设计,将不同浓度的 NaCl 和 CaO NP 施加到苜蓿种子上,观察其生长情况。其次,运用 RNA 提取、cDNA 合成以及实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)技术,分析苜蓿叶片和根部中 miRNA 的表达水平。此外,还采用了一系列生理生化指标测定方法,如测定过氧化氢(H2 O2 )含量、可溶性糖含量、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸含量、光合色素含量以及抗氧化酶(POD 和 SOD)活性等,全面评估苜蓿在不同处理下的生理状态。
研究结果如下:
形态学评估 :盐胁迫下,二倍体 Bilensoy 叶片生长增加,但茎和根长度减少;四倍体 Alsancak 叶片生长持续,茎和根长度变化因盐浓度而异。CaO NP 抑制了两个品种的叶片生长,但在 Bilensoy 中减少了根长,在 Alsancak 中增加了根长。综合处理下,两个品种的生长相对平衡,Alsancak 的根和茎长度增加更为明显。
实时荧光定量 PCR 结果 :在 Bilensoy 中,盐胁迫和 NP 处理使 miR393a、miR166a 和 miR159a 在叶片中下调,miR156a 上调;在根部,miR393a 下调,miR166a、miR156a 和 miR159a 上调。在 Alsancak 中,叶片中 miR393a 和 miR166a 下调,miR156a 和 miR159a 上调;根部中 miR393a 和 miR166a 下调,miR156a 上调,miR159a 的调节因处理而异。
生理指标变化
过氧化氢含量 :盐胁迫下,两个品种叶片和根部的 H2 O2 水平均增加,NP 处理在叶片中增加了 H2 O2 水平,但在 Alsancak 根部减少了 H2 O2 水平。综合处理降低了 H2 O2 水平,尤其是在 Alsancak 的根部。
可溶性糖含量 :盐胁迫下,两个品种叶片和根部的可溶性糖含量均增加。CaO NP 处理在 Bilensoy 叶片中降低了可溶性糖含量,在 Alsancak 叶片中增加了可溶性糖含量;在根部,两个品种的可溶性糖含量变化因 CaO NP 浓度而异。综合处理下,两个品种叶片中的可溶性糖含量变化不同,Bilensoy 根部减少,Alsancak 根部则因剂量而异。
脂质过氧化水平 :盐胁迫导致两个品种叶片和根部的 MDA 含量增加,CaO NP 处理在 Bilensoy 中增加了 MDA 含量,在 Alsancak 中降低了 MDA 含量。综合处理降低了 MDA 含量,表明 NP 处理有助于修复盐胁迫造成的损伤。
脯氨酸水平 :盐胁迫下,两个品种叶片和根部的脯氨酸含量均增加。CaO NP 处理在 Bilensoy 叶片中降低了脯氨酸含量,在 Alsancak 叶片中增加了脯氨酸含量;在根部,两个品种的脯氨酸含量均降低。综合处理降低了 Bilensoy 叶片中的脯氨酸含量,在 Alsancak 根部则表现出差异。
光合色素含量 :盐胁迫降低了两个品种叶片中的叶绿素 a、叶绿素 b、总叶绿素和总类胡萝卜素含量,NP 处理增加了这些色素的含量。综合处理在 Bilensoy 中增强了光合色素含量,在 Alsancak 中则因 NP 剂量而异。
抗氧化酶活性 :盐胁迫下,两个品种叶片和根部的 POD 和 SOD 活性均增加。CaO NP 处理在 Bilensoy 叶片中降低了 POD 活性,在根部则因剂量而异;在 Alsancak 中,POD 和 SOD 活性在叶片和根部均增加。综合处理增强了 Bilensoy 叶片中的 POD 和 SOD 活性,在根部则降低了 POD 活性;在 Alsancak 中,POD 和 SOD 活性在叶片和根部均增加。
研究结论和讨论部分指出,盐胁迫对苜蓿的形态、基因表达和生理响应产生了显著影响,而 CaO NP 的应用能够缓解盐胁迫的负面影响。四倍体 Alsancak 苜蓿品种在应对盐胁迫方面表现出更强的耐受性,这可能与其较大的核大小和更有效的防御机制有关。miRNA 在调节苜蓿对盐胁迫的响应中发挥了重要作用,不同 miRNA 的表达变化反映了苜蓿在盐胁迫下的基因调控机制。此外,研究还发现 NP 处理能够调节植物的生理和生化过程,增强植物的抗盐能力。
这项研究为提高苜蓿的耐盐性提供了新的思路和方法,为农业生产中应对土壤盐碱化问题提供了重要的理论依据。未来,研究人员可以进一步深入探究 CaO NP 与其他抗盐策略的结合,以及 miRNA 在植物抗盐机制中的具体作用,为培育更耐盐的苜蓿品种奠定基础,助力农业的可持续发展。
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